База знаний студента. Реферат, курсовая, контрольная, диплом на заказ

курсовые,контрольные,дипломы,рефераты

Експериментальне вивчення протизапальної активності поліфенольного екстракту з надземної частини лядвенцю рогатого — Медицина, здоровье

МІНІСТЕРСТВО ОХОРОНИ ЗДОРОВ’Я УКРАЇНИ

НАЦІОНАЛЬНИЙ ФАРМАЦЕВТИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ

 

ГАЛУЗІНСЬКА ЛЮБОВ ВАЛЕРІЇВНА

 

УДК 615.322:577.127.4:615.212:615.276

 

ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНЕ ВИВЧЕННЯ ПРОТИЗАПАЛЬНОЇ АКТИВНОСТІ ПОЛІФЕНОЛЬНОГО ЕКСТРАКТУ З НАДЗЕМНОЇ ЧАСТИНИ ЛЯДВЕНЦЮ РОГАТОГО

 

14.03.05. – фармакологія

 

Автореферат

дисертації на здобуття наукового ступеня

кандидата фармацевтичних наук


Харків – 2008


Дисертацією є рукопис

Робота виконана на кафедрі біологічної хімії Національного фармацевтичного університету, Міністерство охорони здоров’я України, м. Харків

Науковий керівник: доктор біологічних наук, професор

ВОРОНІНА ЛАРИСА МИКОЛАЇВНА

Національний фармацевтичний університет,

МОЗ України, м. Харків,

завідувачка кафедри біологічної хімії

Офіційні опоненти: доктор медичних наук, професор

РИЖЕНКО ІРИНА МИХАЙЛІВНА

Національний фармацевтичний університет,

МОЗ України, м. Харків,

професор кафедри фармакології

доктор медичних наук, професор

ЗВЯГІНЦЕВА ТЕТЯНА ВОЛОДИМИРІВНА

Харківський державний медичний університет,

МОЗ України,

завідувачка кафедри фармакології

з медичною рецептурою

Захист дисертації відбудеться 15.02. 2008 року

о _13_ годині на засіданні спеціалізованої вченої ради Д 64.605.01 при

Національному фармацевтичному університеті за адресою: 61002, м. Харків, вул. Пушкінська, 53.

З дисертацією можна ознайомитись у бібліотеці Національного фармацевтичного університету (61168, м. Харків, вул. Блюхера, 4).

Автореферат розісланий 12.01.2008 року

Вчений секретар

спеціалізованої вченої ради,

доктор біологічних наук, професор                                   Л.М. Малоштан


ЗАГАЛЬНА ХАРАКТЕРИСТИКА РОБОТИ

 

Актуальність теми. Нестероїдні протизапальні препарати (НПЗП) вже більше 100 років активно використовуються в клінічній практиці та посідають провідне місце в фармакотерапії багатьох захворювань запального ґенезу (Дзяк Г.В., 1999; Белоусов Ю.Б., 2000; Насонов Е. Л., 2002; Барсукова Е.Л., 2004; Свинцицкий А. С., 2004). Враховуючи широке споживання НПЗП, важливим є питання про ефективність та безпеку їх використання, тому що вони займають одне з перших місць за кількістю та важкістю побічних ефектів (Насонов Е.Л., 1998; Ушкалова Е.А., 2005; Штриголь С.Ю., 2005).

На першому місці серед ускладнень при застосуванні НПЗП стоїть ураження шлунково-кишкового тракту (ШКТ) (Григорьев П.Я., 1997; Dequeker J.,1998). Більшість з препаратів здатна викликати побічні ефекти з боку ЦНС, які за частотою займають друге місце після гастропатій (De Broe M.E., 1999; Hawkey C.J., 2003). Різноманітні прояви з боку шкіри і слизових оболонок складають 8-10% усіх побічних реакцій і відзначаються при використанні піразолонів і піразолідонів (Гребенева Л.С., 1997; Насонов Е.Л., 2000). НПЗП властива також гепатотоксична дія (Меньшикова Е.Б., 1997; Nyompa A.M., 1996), здатність викликати важкий бронхоспазм (Дзяк Г.В., 2000), гемолітичну анемію, тромбоцитопенію (Насонов Е. Л., 2002). Не менш серйозною проблемою, масштаби якої стали очевидними тільки останнім часом, є НПЗП-індукована нефротоксичність (Hao C.M, 1999; Fored C.M., 2001; Wali R. K., 2002).

Таким чином, пошук ефективних НПЗП, у яких би була відсутня побічна дія при збереженні потужного протизапального ефекту, залишається актуальною проблемою сучасної фармакології.

Важливим напрямком у вирішенні цієї проблеми є створення нових протизапальних препаратів на основі рослинної сировини, які мають нижчу токсичність та меншу кількість побічних ефектів, ніж синтетичні НПЗП (Сандер С.В., 1996; Чекман І.С., 2001).

Виходячи з цього, увагу привернули рослини роду Лядвенець (Lotus L.) родина бобових (Fabaceae), які широко представлені у світовій флорі (Середземномор’я, Середня та Східна Азія, Європа, а також Україна) і нараховують 80 видів. Найбільш розповсюджений на Україні Лядвенець рогатий (Lotus corniculatus) (Яковлев Г.П., 1991). На кафедрі фармакогнозії НФаУ з надземної частини Лядвенцю рогатого було розроблено та отримано новий поліфенольний екстракт під умовною назвою “Локорин” (Король В.В., 1999). Хімічний склад екстракту “Локорин” дозволяє припустити широкий спектр його фармакологічної активності, включаючи і протизапальну дію.

У зв’язку з цим експериментальне обґрунтування застосування екстракту “Локорин” є доцільним, та перспективною є можливість створення на його основі нового лікарського препарату, який розширить номенклатуру існуючих рослинних лікувальних засобів і, можливо, стане альтернативою сучасним НПЗП.

Зв'язок роботи з науковими програмами, планами, темами. Робота виконана у рамках науково-дослідної програми Національного фармацевтичного університету з проблеми МОЗ України “Фармакологічне дослідження біологічно активних речовин і лікарських засобів синтетичного та природного походження, їх застосування в медичній практиці” (№ Державної реєстрації 0103U000478).

Мета та завдання дослідження. Метою даної роботи є вивчення фармакодинаміки поліфенольного екстракту “Локорин” і обґрунтування його терапевтичної ефективності на різних стадіях запального процесу.

Для досягнення вказаної мети були поставлені наступні завдання:

1.         Провести фармакологічний скринінг протизапальної, анальгетичної, жарознижувальної активності екстракту “Локорин” та визначити ЕД50 за протизапальною активністю.

2.          Дослідити протизапальну дію екстракту “Локорин” на моделях запалення з вираженим ексудативним компонентом з використанням різних флогогенів.

3.         Провести дослідження антипроліферативних властивостей екстракту “Локорин”.

4.         Вивчити вплив екстракту “Локорин” на перебіг запалення з вираженим альтеративним компонентом на моделях спиртово-преднізолонової і індометацинової виразок шлунка та “трафаретної рани”.

5.         З’ясувати антиоксидантну дію екстракту “Локорин” на моделях з мембранною патологією.

6.         Вивчити параметри гострої токсичності досліджуваного екстракту та його вплив на функціональний стан ШКТ.

Об’єкт дослідження. Протизапальні властивості поліфенольного екстракту “Локорин”, вплив на перебіг запалення у щурів при різних модельних патологіях, антиоксидантна дія, а також його токсичні властивості.

Предмет дослідження. Поліфенольний екстракт з надземної частини Лядвенцю рогатого під умовною назвою “Локорин”.

Методи дослідження. При виконанні дисертаційної роботи використовувався комплексний методичний підхід із залученням фармакологічних, токсикологічних, біохімічних, гематологічних, гістологічних та статистичних методів дослідження.

Наукова новизна. Вперше на основі результатів експериментальних досліджень встановлена виразна протизапальна дія екстракту “Локорин” на різних модельних патологіях запалення, які характеризуються виразністю окремих фаз запального процесу (ексудації та альтерації).

Показана висока антиексудативна активність екстракту “Локорин” на моделях гострого запалення, репаративна, кардіопротекторна, гепатопротекторна, противиразкова дія.

Встановлено, що протизапальна дія досліджуваного екстракту обумовлена його мембранопротекторними, антиоксидантними та капілярозміцнювальними властивостями.

Доведено, що досліджуваний екстракт відноситься до класу відносно нешкідливих речовин і не чинить негативного впливу на функцію ШКТ (не впливає на секрецію шлункового соку, перистальтику кишечнику, не чинить місцевоподразнювальної дії на слизову оболонку шлунка).

Наукова новизна дисертаційної роботи підтверджена деклараційним патентом на корисну модель № 18309 “Безвідходний спосіб одержання біологічно активних комплексів з Лядвенцю рогатого” від 15.11.2006 р.

Практичне значення одержаних результатів. За результатами експериментальних досліджень розроблений та виданий інформаційний лист №23–2007 “Використання субстанцій рослинного походження „Локорин” та густого екстракту з листя Винограду культурного для розробки гепатозахисних засобів”.

Результати проведених досліджень впроваджені в навчальний процес на кафедрах: експериментальної та клінічної фармакології з клінічною імунологією та алергологією “Українська медична стоматологічна академія” Вищого державного навчального закладу України (м. Полтава) та військової фармації Української військово-медичної академії (м. Київ).

На підставі експериментальних даних доведена доцільність проведення подальших досліджень з метою створення лікарської форми екстракту “Локорин”.

Особистий внесок здобувача. Дисертаційна робота виконана на кафедрі біологічної хімії та на базі ЦНДЛ НФаУ. Разом з науковим керівником сформульовані мета та завдання дослідження, розроблені методичні підходи до вибору адекватних моделей при виконанні експериментальної частини роботи. Особисто проведені інформаційно-патентний пошук, аналіз джерел літератури, експериментальні дослідження, статистична обробка, аналіз та систематизація отриманих результатів, сформульовані основні положення та висновки дисертації.

Апробація роботи. Основні положення дисертаційної роботи викладалися та обговорювалися на: ІІІ Міжнародній науково-практичній конференції “Наука і соціальні проблеми суспільства: медицина, фармація, біотехнологія” (м.Харків, 2003); Всеукраїнському науково-практичному семінарі “Перспективи створення в Україні лікарських препаратів різної спрямованості дії” (м.Харків, 2004); V Всеукраїнській науково-методичній конференції “Клінічна фармація в Україні” (м.Харків, 2004); Всеукраїнській науково-методичній конференції “Хімія природних сполук” (м.Тернопіль, 2005); Міжнародній науково-практичній конференції “Розвиток наукових досліджень 2005 р.” (м.Полтава), ІІІ Національному з’їзді фармакологів України (м.Одеса, 2006).

Публікації. За матеріалами дисертації опубліковано 10 статей, з них 5 - у фахових виданнях, ліцензованих ВАК України, 6 тез доповідей, 1 патент та 1 інформаційний лист .

Об’єм і структура дисертації. Дисертаційна робота складається з переліку умовних скорочень, вступу, літературного огляду, опису матеріалів та методів дослідження, 4-х розділів власних досліджень, аналізу отриманих результатів, висновків та переліку використаної літератури. Загальний об’єм дисертації складає 170 сторінок машинописного тексту. Робота ілюстрована 36 таблицями, 14 рисунками. Список використаних джерел літератури складає 246 найменувань, з яких 121 – іноземних авторів.


ОСНОВНИЙ ЗМІСТ РОБОТИ

 

Матеріали та методи дослідження. Фармакологічні дослідження проведені на 636 білих безпородних статевозрілих щурах обох статей масою 150-220г та 53 білих безпородних статевозрілих мишах масою 20-30г, що були вирощені в розпліднику віварію ЦНДЛ НФаУ та утримувались на збалансованому стандартному раціоні у відповідності з санітарно-гігієнічними нормами (Науково-практичні рекомендації з утримання лабораторних тварин та роботи з ними, 2002). Експерименти проводили згідно з „Загальними етичними принципами експериментів на тваринах” (Україна, 2001), що узгоджуються з положеннями „Європейської конвенції про захист хребетних тварин, які використовуються для експериментальних та інших наукових цілей” (Страсбург, 1985).

Основні етапи проведених досліджень представлені на схемі.

Відомо, що патофізіологічними проявами запалення є біль, набряк, гіперемія, гіпертермія та порушення функції органу (Алексеев В.В., 2003). Тому на етапі скринінгових досліджень вивчали антиексудативну активність на моделі гострого карагенінового набряку, анальгетичну активність на моделі “оцтовокислих корчів” (Доклінічні дослідження лікарських засобів, 2001) жарознижувальну дію на моделі “молочної лихоманки” (Тринус Ф.П., 1974). Екстракт “Локорин” досліджували в дозах 10, 25, 50, 100 та 200 мг/кг при одноразовому внутрішньошлунковому введенні щурам. Як препарати порівняння служили диклофенак натрію (ЕД50, 8 мг/кг) і гранули кверцетину в умовно терапевтичній дозі 5 мг/кг − антиексудативна активність; анальгін (ЕД50, 55 мг/кг) і диклофенак натрію (ЕД50, 5 мг/кг) − анальгетична активність; ацетилсаліцилова кислота (АСК) (ЕД50 , 50 мг/кг) та диклофенак натрію (ЕД50, 5 мг/кг) − жарознижувальна активність.

При поглибленому вивченні протизапальної дії екстракту “Локорин” важливим було дослідити його вплив на такі стадії запалення, як альтерація, ексудація і проліферація.

Дослідження антиексудативних властивостей екстракту “Локорин” у дозі ЕД50, 50 мг/кг проводили на моделях запалення задньої кінцівки у щурів з використанням таких флогогенів, як 0,1% розчину гістаміну, 2% суспензії зимозану і на моделі гострого асептичного перитоніту (Доклінічні дослідження лікарських засобів, 2001).

Антиексудативну дію екстракту в умовах експериментального перитоніту вивчали через добу після внутрішньоочеревинного введення щурам розчину Люголю і оцінювали за показником приросту окружності черева, а також біохімічними показниками сироватки крові: вмістом глікопротеїнів (ГП) (Штейнберг О.П., Доценко Я.Н., 1984), концентрацією сіалових кислот та середніх молекул (Камышников В.С., 2000). Експерименти проводили у порівнянні з диклофенаком натрію та кверцетином.

Антипроліферативну активність екстракту “Локорин” визначали на моделі „ватної гранулеми” (Доклінічні дослідження лікарських засобів, 2001) і порівнювали з диклофенаком натрію та кверцетином.

На наступному етапі вивчали антиальтеративну активність екстракту

“Локорин” у дозі 50 мг/кг на таких модельних патологіях, як “трафаретні рани”, спиртово-преднізолонова виразка шлунка (Доклінічні дослідження лікарських засобів, 2001) та індометацинова виразка шлунка (Derelanko M. G., 1980).

Скринінгові дослідження екстракту “Локорин”:

–     антиексудативна активність (карагеніновий набряк) з визначенням ЕД50

–     анальгетична активність (“оцтовокислі корчі”)

–     жарознижувальна активність (модель “молочної лихоманки”)

 
І етап

ІІ етап

Поглиблене вивчення протизапальної дії екстракту “Локорин”

 

Антиальтеративна активність:

–     “трафаретна рана” (репаративна активність) − планіметричні показники, біохімічні показники сироватки крові (ТБК-реактанти, ГП, АлАТ), гематологічні показники (гемоглобін, еритроцити, лейкоцитарна формула)

–     спиртово-преднізолонова та індометацинова виразки шлунка (противиразкова активність) − біохімічні показники сироватки крові, гомогенатів шлунка та печінки ( (ТБК-реактанти, ДК, GSH)

–    

 

 


ІІІ етап

Дослідження антиоксидантної дії екстракту “Локорин” на моделях

 з мембранною патологією:

–     антиокиснювальна активність: in vitro та in vivo (гомогенат печінки – спонтанне та аскорбатіндуковане ПОЛ)

–     мембраностабілізувальна активність (спонтанний гемоліз за Ягером)

–     капілярозміцнювальна активність (проникливість судин за методом Голікова П.П.)

–     гепатопротекторна активність (гострий тетрахлорметановий гепатит) − біохімічні показники сироватки крові та гомогенату печінки (АлАТ, ЛФ, г-ГТП, ТБК-реактанти,  ДК, АГП, GSH, каталаза), КМП, гістологічне дослідження печінки методом світлової мікроскопії

–     кардіопротекторна активність (ізадриновий міокардит) − біохімічні показники сироватки крові та гомогенату серця (ЛДГ, КФК, АсАТ, ТБК-реактанти та ДК), КМС, показники ЕКГ

 


ІVетап

Вивчення токсичних властивостей екстракту “Локорин”:

–     гостра токсичність (ЕД50 , експрес-метод Пастушенко Т.В.)

–     розрахунок КВЧ, ТІ

–     вплив на стан слизової оболонки та секреторну функцію шлунка, рухову активність ШКТ)

 


Схема. Етапи та основні методи фармакологічних досліджень поліфенольного екстракту “Локорин”.

Інтенсивність альтеративного запалення на моделі стандартних шкіряних ран оцінювали за динамікою планіметричних показників (стан рани, їх площа) з 2-ої доби до повного загоєння ран (19-та доба), вмістом ГП та ТБК-реактантів (Стальная И.Д., Гавришвили Т.Г., 1977) в сироватці крові, а також за динамікою показників периферичної крові у щурів (Камышников В.С., 2000) на 5-ту, 9-ту та 13-ту добу досліду. Референс-препаратом був диклофенак натрію в дозі 8 мг/кг.

При вивченні противиразкової активності екстракту “Локорин” визначали показники, які узагальнено характеризують збалансованість ПОЛ та АОС у сироватці крові (спиртово-преднізолонова виразка шлунка), гомогенаті печінки (індометацинова виразка шлунка) та гомогенатах шлунка в умовах даних патологій у порівнянні з кверцетином у дозі 5 мг/кг.

Для встановлення антиоксидантної дії екстракту “Локорин” проводили вивчення його антиокиснювальних властивостей в системі in vitro на моделі спонтанного та аскорбатіндукованого ПОЛ в гомогенаті печінки (Владимиров Ю.А., Арчаков А.И.,1972). З метою підтвердження ефективності в умовах in vivo визначали антиоксидантну дію екстракту “Локорин” на моделі гострого тетрахлорметанового гепатиту. Мембраностабілізувальну активність екстракту “Локорин” вивчали за методом F.C.Jager (Вороніна Л.М. зі співавт., 1996), капілярозміцнювальну дію досліджували відповідно до методу Голікова П.П., 1964.

Гепатопротекторну активність вивчали на моделі гострого ураження печінки тетрахлорметаном. В умовах даної патології досліджували в гомогенаті печінки деякі показники ПОЛ - ТБК-реактанти, дієнові кон’югати (ДК), ацилгідропероксиди (АГП) (Стальная И.Д., Гавришвили Т.Г., 1977) та систему антиоксидантного захисту за вмістом відновленого глутатіону (GSH) (Beutler E.D., at al., 1963) та активністю каталази у гомогенаті печінки (Королюк М.А., 1988). У сироватці крові визначали активність аланінамінотрансферази (АлАТ), гамма-глутамілтранспептидази (г-ГТП), лужної фосфатази (ЛФ) у порівнянні з гепатопротектором силібором в дозі ЕД30, 25 мг/кг (Камышников В.С., 2000).

Морфоструктуру зразків печінки вивчали за допомогою стандартного методу світлової мікроскопії (Меркулов Г.А, 1969, Соколовский В.В., 1971).

Кардіопротекторну активність в умовах ізадринового міокардиту визначали за активністю ферментів аспартатамінотрансферази (АсАТ), лактатдегідрогенази (ЛДГ), креатинфосфокінази (КФК) (Камышников В.С., 2000) в сироватці крові та в гомогенаті серця досліджували вміст ТБК-реактантів та ДК (Стальная И.Д., Гавришвили Т.Г., 1977). Кардіопротекторну дію екстракту “Локорин” характеризували також за показниками ЕКГ і порівнювали з диклофенаком натрію в дозі 8 мг/кг.

Гостру токсичність з розрахунком середньолетальних доз при внутрішньошлунковому та внутрішньоочеревинному введенні мишам та щурам проводили за методом Пастушенко Т.В. зі співавт., 1978. Ступінь токсичності визначали за класифікацією Сидорова К.К., 1973. Вплив вивчаємого екстракту на стан слизової оболонки шлунка та секрецію шлункового соку вивчали за методом Андрєєвої Н.І. та Шарової С.Д., 1978, на рухову активність ШКТ згідно з методом Sticknay I.S., 1951.

Експериментальні дані оброблені методами варіаційної статистики з використанням критерію Ст’юдента (t) (Иванов Ю.И., Погорелюк Р.Н.,1990).

Результати досліджень та їх обговорення. Результати скринінгових досліджень протизапальної дії екстракту “Локорин”, яка включає антиексудативну, анальгетичну та жарознижувальну активності, наведені на рисунках 1-3.

Показано, що вплив екстракту “Локорин” на розвиток карагенінового запалення залежав від дози, яку вводили щурам. В дозах 10 мг/кг та 25 мг/кг антиексудативна активність на 3-й годині досліду (пік запалення) дорівнювала 3,7% та 37,5%, відповідно (рис. 1). Найбільша антиексудативна активність була в дозі 50 мг/кг (47,1%). Подальше підвищення її до 100 мг/кг та 200 мг/кг призводило до зменшення фармакологічного ефекту. ЕД50 досліджуваного екстракту дорівнювала 50 мг/кг. Антиексудативна активність екстракту “Локорин” наближалась до активності диклофенаку натрію (53,9%) та перевищувала таку у кверцетину в 1,7 рази. Отримані дані свідчать про можливість вивчаємого екстракту впливати на простагландинову фазу карагенінового запалення і пригнічувати циклооксигеназу. Більш виразна активність в порівнянні з кверцетином, можливо, обумовлена хімічним складом екстракту “Локорин”, до якого окрім флавоноїдів входять оксикоричні кислоти, дубільні речовини, і здатністю фенольних рослинних речовин пригнічувати ферменти циклооксигеназного шляху метаболізму арахідонової кислоти (Henry D. et al., 1996).

Рис.1. Скринінгове дослідження антиексудативної активності екстракту “Локорин” на моделі карагенінового запалення.

Примітки:

1.*- відмінність достовірна по відношенню до контрольної патології (р£ 0,05);

2.** - відмінність достовірна по відношенню до кверцетину (р£ 0,05).

Анальгетичну активність на моделі “оцтовокислих корчів” у щурів екстракт “Локорин” проявив в усіх досліджуваних дозах, але виразна дія була притаманна дозам 50 мг/кг та 100 мг/ кг (57,7% та 56,2%, відповідно) (рис.2). При цьому за анальгетичною активністю він не поступався анальгіну (60,6%) та перевищував активність диклофенаку натрію (45,1%). Результати досліджень свідчать про вплив екстракту “Локорин” на периферичні компоненти механізму розвитку болю, одним з яких є пригнічення фази ексудації запальної реакції і зменшення механічного тиску на больові рецептори.
 

Рис.2. Скринінгове дослідження   Рис.3. Скринінгове дослідження

анальгетичної активності              жарознижувальної активності

екстракту “Локорин”.                     екстакту “Локорин”.

Примітки:

1.*- відмінність достовірна по відношенню до контрольної патології (р£ 0,05);

2.** - відмінність достовірна по відношенню до диклофенаку натрію (р£ 0,05).

Введення досліджуваного екстракту в різних дозах приводило до зменшення температури тіла у щурів з експериментальною лихоманкою (рис.3). Найбільшу жарознижувальну дію спостерігали в дозі 50 мг/кг (74,2 %). Підвищення дози до 200 мг/кг не виявило достовірного зменшення температури тіла у щурів. За жарознижувальною активністю екстракт “Локорин” у дозі 50 мг/кг перевищував ефект диклофенаку натрію в 1,3 рази, але значно поступався АСК. Ймовірно, антипірична дія екстракту проявляється за рахунок гальмування утворення простагландинів (ПГ).

Таким чином, наведені дані свідчать, що протизапальна дія екстракту “Локорин” у дозі 50 мг/кг може бути пов’язана із пригніченням циклооксигеназної активності та впливом на периферичні механізми формування болю. Ці результати стали підставою для подальшого вивчення його протизапальної дії в дозі ЕД50 − 50 мг/кг.

В зв’язку з цим, досліджували вплив екстракту “Локорин” на кожну стадію запалення: альтерацію, ексудацію та проліферацію.

Поглиблене вивчення антиексудативної активності проводили на моделях запалення задньої кінцівки у щурів з використанням різних флогогенів (зимозановий і гістаміновий набряки).

Аналіз результатів дослідження на моделі зимозанового набряку показав, що екстракт “Локорин” проявляв виражену антиексудативну активність, про що свідчило достовірне зменшення об’єму лапи щурів протягом всього експерименту (середня активність 38,6%). Оскільки екстракт виявляв високу антиексудативну активність (59,9 %) через 0,5 години (пік запалення) після введення тваринам зимозану, то можна припустити, що він має антиліпооксигеназну активність, яка перевершує активність диклофенаку натрію (29,8%), для якого характерна висока антициклооксигеназна дія (рис.4). Це підтверджується даними літератури, що лікарські препарати, які мають у своєму складі фенольні сполуки, інгібують ліпооксигеназу (Dehmlow C. et al., 1996). В той же час на 3-й годині експерименту антиексудативна активність екстракту “Локорин” становила 38,8%. Останнє дозволяє припустити, що на ранніх етапах розвитку запального процесу він активно пригнічує утворення лейкотриєнів, а через 3 години помірно гальмує синтез ПГ.

Рис.4. Антиексудативна активність екстракту “Локорин” на моделі зимозанового та гістамінового набряків задньої кінцівки у щурів.

Примітки:

1.*- відмінність достовірна по відношенню до контрольної патології (р£ 0,05);

2.** - відмінність достовірна по відношенню до диклофенаку натрію (р£ 0,05).

На моделі гістамінового набряку екстракт “Локорин” активно пригнічував розвиток набряку протягом 2-х годин (середня активність 43,4%). Антиексудативна активність препаратів порівняння диклофенаку натрію становила 40,8%, а кверцетину 35,9%. На рисунку 4 показано, що через 0,5 години (пік запалення) досліджуваний екстракт виразно зменшував ступінь набряку на 51,3% і не поступався ефекту референс-препаратів. Отримані дані пояснюються потужною судинозміцнювальною дією флавоноїдів (Чекман І.С., 2000), які входять до складу екстракту “Локорин”. Внаслідок цього зменшується проникливість кровоносних судин, що призводить до інволюції набряку.

В умовах гострого перитоніту у щурів, де в якості флогогену використовували розчин Люголя, після лікування екстрактом “Локорин” спостерігалось зниження приросту окружності черева у тварин в 2,1 рази в порівнянні з контрольною патологією. Антиексудативна активність екстракту становила 57,5% (рис. 5) і супроводжувалась більш низьким рівнем у сироватці крові тварин ГП, сіалових кислот, вміста середніх молекул (у 1,3; 1,8 та 1,9 рази, відповідно), ніж у щурів контрольної групи. Отримані результати свідчать про спроможність екстракту “Локорин” перешкоджати деструкції клітинних мембран і вираженій інтоксикації організму за рахунок обмеження ексудативних процесів.

Антиексудативна активність його співставлювана з аналогічним ефектом диклофенаку натрію (55,5%) і перевищувала ефект кверцетину (37,9%). Вірогідні переваги досліджуємого екстракту щодо гальмування впливу на вивільнення маркерів інтоксикації – середніх молекул і сіалових кислот, пов’язані, ймовірно, з дещо відмінним від кверцетину механізмом антиексудативної дії, а саме домінуючим впливом на ліпооксигеназний і вираженим на циклооксигеназний шляхи метаболізму арахідонової кислоти.

Таким чином, результати дослідів з вивчення протизапальної дії екстракту “Локорин” на всіх експериментальних моделях гострого запалення свідчать про високу антиексудативну активність.

Рис.5. Антиексудативна активність екстракту “Локорин” на моделі гострого асептичного перитоніту у щурів.

Примітки:

1.*- відмінність достовірна по відношенню до контрольної патології (р£ 0,05);

2.** - відмінність достовірна по відношенню до диклофенаку натрію(р£ 0,05);

3. *** - відмінність достовірна по відношенню до кверцетину (р£ 0,05).

Вивчення антипроліферативної активності екстракту “Локорин” показало, що вона була незначною і складала (29,1 %). Це співпадає з даними літератури, які підтверджують, що поліфенольні сполуки не спроможні активно подавляти фазу проліферації запалення (Чернов Ю.Н. и соавт., 1990).

В якості експериментальних моделей для дослідження антиальтеративної дії використовували моделі “трафаретної рани” та виразок шлунка (спиртово-преднізолонової та індометацинової).

Дослідження антиальтеративної дії виявили здатність екстракту “Локорин” впливати на репаративні процеси в рані, про що свідчило достовірне зменшення площі рани в 1,6 рази на 5 добу та прискорення швидкості їх загоєння в 3,3 рази, а під дією диклофенаку натрію лише в 2,2 рази в порівнянні з контрольною патологією. Під впливом екстракту у щурів в динаміці (5-й, 9-й та 13-й дні) спостерігалось поступове зниження в сироватці крові ТБК-реактантів, вмісту ГП та цитолітичного ферменту АлАТ, що вказує на пригнічення процесів ПОЛ і наявність у нього мембранопротекторних властивостей. Характерні зміни відмічались з боку гематологічних показників: достовірне підвищення кількості еритроцитів та внаслідок цього – гемоглобіну. На 13-й день дані показники були на рівні інтактного контролю. В той же час препарат порівняння менш активно і лише на 9-й та 13-й день починав нормалізувати вивчаємі показники. Проведені дослідження показали, що екстракт “Локорин” проявив більш виражену протизапальну дію, ніж НПЗП, про що свідчила динаміка показників крові: достовірне зменшення лейкоцитів (13-й день), тенденція до зниження кількості паличкоядерних, сегментоядерних нейтрофілів, моноцитів, та збільшення лімфоцитів у порівнянні з контрольною патологією. Аналіз отриманих даних свідчить, що протизапальні властивості екстракту “Локорин” виявляються як на початку, так і на пізніх етапах запального процесу. За протизапальними властивостями він перевищує ефект референс-препарату, що пов’язано зі спроможністю поліфенолів інгібувати розвиток процесів вільнорадикального окиснення (ВРО) та стабілізувати клітинні мембрани.

На наступному етапі було проведено вивчення противиразкової дії екстракту “Локорин”. Введення двох агресивних факторів - етилового спирту та преднізолону, який пригнічує активність фосфоліпаз, призводило до утворення виразок в шлунку у щурів. Застосування екстракту “Локорин” позначилось зменшенням ступеня виразкового дефекту на 55,3%, а кверцетину ¾ на 51,7%. (рис. 6).

Рис.6. Вплив екстракту “Локорин” на перебіг спиртово-преднізолонової виразки шлунка у щурів.

Примітки:

1.*- відмінність достовірна по відношенню до інтакту (р£ 0,05);

2.** - відмінність достовірна по відношенню до контрольної патології (р£ 0,05).

Гальмування процесу ПОЛ відобразилось достовірним до значень контрольної патології зменшенням у сироватці крові вмісту ТБК-реактантів у 1,8 рази, ДК у 1,4 рази, а позитивний вплив на стан АОС характеризувався збільшенням GSH у 1,2 рази. В гомогенаті шлунка простежувалась така ж сама тенденція відносно цих показників.

Лікування екстрактом “Локорин” індометацинової виразки достовірно зменшувало виразкоутворення більш, ніж в 2 рази, набряк та гіперемія слизової оболонки майже не спостерігались. Противиразкова активність екстракту “Локорин” складала 50,8%, а кверцетину 42,6% (рис.7). Згідно з даними літератури, введення щурам індометацину у великих дозах викликає порушення функціонального стану печінки: інтенсифікацію ПОЛ мембран гепатоцитів, зменшення резерву GSH (Derelanko M. G., 1980). Наші дослідження підтвердили гепатотоксичність даного НПЗП (рис.7). В умовах даної патології зміни показників ПОЛ та АОС при застосуванні екстракту “Локорин” мали спрямованість до нормалізації. Вщухання процесів ПОЛ на рівні шлунка також супроводжувалось достовірним зменшенням вмісту ТБК-реактантів в 1,5 рази та підвищенням в 1,3 рази глутатіонового захисту в гомогенаті печінки в порівнянні з нелікованими тваринам. Таким чином, в умовах експериментальних виразок шлунка у білих щурів доведена наявність у екстракту “Локорин” противиразкової дії, яка однакова за виразністю з ефектом кверцетину.

Рис.7. Вплив екстракту “Локорин” на перебіг індометацинової виразки шлунка у щурів.

Примітки:

1.*- відмінність достовірна по відношенню до інтакту (р£ 0,05);

2.** - відмінність достовірна по відношенню до контрольної патології (р£ 0,05).

Як відомо, протизапальна дія поліфенольних сполук частково пояснюється їх антиоксидантними, мембраностабілізувальними та капілярозміцнюючими властивостями (Чекман І.С., 2000). За даними Меньщикової Е.Б. та Зенкова Н.К., 1997, запальний процес є системною реакцією, що супроводжується інтенсифікацією процесів ВРО та накопиченням продуктів ПОЛ. Тому, на наступному етапі вивчали антиокиснювальні властивості екстракту “Локорин” in vitro та in vivo. Показано, що екстракт “Локорин” володіє вираженою антиокиснювальною активністю, яка в середньому вища за активність природного антиоксиданту−a-токоферола в 2,5 рази в умовах спонтанного ПОЛ і в 1,5 рази при індукції ПОЛ аскорбатом. При цьому спроможність екстракту блокувати процеси ліпопероксидації проявилась вже в перші хвилини після початку інкубації.

Отримані результати узгоджуються з даними Шкариної Е.І.з соавт., 1998 про те, що поліфенольні сполуки здатні зв’язувати активні метаболіти кисню, які є індукторами ПОЛ на ранніх етапах. Крім того, спроможність екстракту “Локорин” інгібувати аскорбатіндуковане ПОЛ, може бути також пов’язана зі здатністю флавоноїдів утворювати хелатні комплекси з металами, виключаючи їх каталітичну дію у процесах ПОЛ ( Казимирко В.К., 2004), і виступати екзогенними природними низькомолекулярними антиоксидантими.

У наступній серії дослідів вивчались антиоксидантні властивості екстракту “Локорин” in vivo на моделі гострого тетрахлорметанового гепатиту. При введенні його щурам в дозі 50 мг/кг вміст кінцевих продуктів ПОЛ ТБК-реактантів у гомогенаті печінки був суттєво нижчим у порівнянні з контролем, що свідчить про спроможність досліджуваного екстракту знижувати інтенсивність процесів ВРО. При цьому антиоксидантна активність екстракту “Локорин” і препарату порівняння a-токоферолу (ЕД50, 50 мг/кг) були однакові (46,8% і 44,4%, відповідно). Таким чином, показано, що досліджуємий екстракт суттєво покращує антиоксидантно-прооксидантний статус печінки за рахунок як пригнічення інтенсивності процесів ПОЛ та стабілізації клітинних мембран, так і зміцнення антиоксидантної системи захисту.

Антиоксидантні властивості є одним із компонентів мембраностабілізувальної дії екстракту, яка відіграє важливу роль в реалізації протизапального ефекту. Тому нами вивчалась мембранопротекторна активність екстракту „Локорин” на моделі спонтанного гемолізу еритроцитів. Отримані результати свідчать про високу мембранопротекторну дію досліджуваного екстракту (49,9%), яка достовірно не відрізнялась від такої у a-токоферолу (31%), але в 2,3 рази перевищувала активність кверцетину в дозі 5 мг/кг (21,6%). Це можна пояснити тим, що поліфенольні сполуки рослин здатні вбудовуватися в гідрофільну фазу мембран і виконувати функцію антиоксидантного резерву, що призводить до збалансованості компонентів ПОЛ−АОС і стабілізації фосфоліпідної матриці мембран. Дубільні речовини реагують з мембранними білками і утворюють з ними комплекси, що теж сприяє стабілізації клітинних мембран зі збереженням їх структури та функції (Барабой В.А., 1984; Чекман І.С., 2000)

Оскільки важливими фармакологічними властивостями рослинних поліфенолів є здатність ущільнювати клітинні мембрани та підсилювати резистентність стінок судин, було доцільним вивчити вплив екстракту “Локорин” на судинну проникність. Результати експериментів показали наявність у нього судиностабілізувального ефекту, який був найбільш вираженим на моделі уповільнення забарвлення зимозанової папули. Екстракт достовірно в 2 рази затримував вихід барвника з кровоносного русла відносно контрольної патології. На моделі гістамінової папули досліджуваний показник підвищувався в 1,4 рази, а при введенні щурам білку лише в 1,2 рази. Аналогічний судиностабілізувальний ефект показував і кверцетин ув дозі 50 мг/кг.

Вивчення антиоксидантних властивостей проводили на моделі тетрахлорметанового гепатиту. Введення екстракту “Локорин” у лікувально-профілактичному режимі запобігає активації вільнорадикальних реакцій і розвитку синдрома цитолізу гепатоцитів, що підтверджується позитивними змінами біохімічних показників (рис. 8). Так, зменшувався вміст АГП, ТБК-реактантів і ДК в гомогенаті печінки в 1,7 рази, 1,9 рази та 1,6 рази, відповідно в порівнянні з контрольною патологією. У тварин поліпшились показники АОС, зокрема, до норми зріс рівень GSH, а вміст каталази - в 1,5 рази. Відновлення функціонування компонентів антиоксидантного захисту організму реалізується, напевно, через участь атому гідрогену поліфенолів екстракту в окиснювально-відновних реакціях. У сироватці крові спостерігали зниження активності маркерних ферментів цитолізу АлАТ в 1,5 рази, ферментів ЛФ та g-ГТП в 1,2 рази, ніж у щурів контрольної патології, що свідчить про регресію холестатичного та цитолітичного синдромів.

Рис.8. Вплив екстракту “Локорин” на перебіг тетрахлорметанового гепатиту щурів.

Примітки:

1.*- відмінність достовірна по відношенню до інтакту (р£ 0,05);

2.** - відмінність достовірна по відношенню до контрольної патології (р£ 0,05).

Гістологічні дослідження підтвердили гепатопротекторну дію екстракту “Локорин”, після введення якого значно поліпшився стан печінкової паренхіми. Він нормалізував структуру печінки на тлі активації клітинних і особливо внутрішньоклітинних регенеративних процесів.

При введенні тваринам референс-препарату силібору в дозі 25 мг/кг спостерігалися подібні зміни оксидативного балансу і позитивний його вплив на морфоструктуру печінки. Таким чином, в умовах гострого токсичного гепатиту екстракт “Локорин” чинив гепатозахисну дію, про що свідчать запобігання накопиченню продуктів пероксидації і розвитку синдрому цитолізу за рахунок як прямих, так і опосередкованих механізмів, а також мембраностабілізуючої дії.

Наступною моделлю, використаною для вивчення антиоксидантної дії екстракту “Локорин”, була модель ізадринового міокардиту. Міокардит характеризується розвитком ексудативних, проліферативних процесів та цитолізом кардіоміоцитів. У патогенезі цих змін відмічається активація процесів ПОЛ та виснаження АОС (Цубанова Н.А., 2004). Патологічні зміни в міокарді супроводжувались порушенням функцій серця, на що вказували показники ЕКГ: частота серцевих скорочень (ЧСС) носила характер тахі-брадиаритмії, мало місце пригнічення процесів збудження та провідності (збільшення тривалості шлуночкового комплексу Q-T), зростання амплітуд зубців Р і Т, спостерігали розвиток ішемії (відхилення ST від ізолінії).

Виживаність щурів в групі контрольної патології - 71%, коефіцієнт маси серця (КМС) зріс в 1,4 рази в порівняні з інтактними тваринами (рис. 9). В гомогенаті серця спостерігали підвищення вмісту ключових продуктів ліпопероксидації (ТБК-реактантів, ДК), в сироватці крові − гіперферментемію: АсАТ, КФК, ЛДГ, які є найбільш специфічними маркерами порушення окиснювального метаболізму у міокарді та розвитку дистрофічно-некротичних процесів (Резников К.М. и соавт., 1985). Одним з проявів кардіопротекторної дії екстракту „Локорин” в дозі 50 мг/кг був показник виживаності тварин, який зріс до 100%, а КМС зменшився в 1,3 рази. Мало місце достовірне зменшення концентрації продуктів ПОЛ, а також активності ЛДГ (в 1,5 рази), АсАТ (в 1,6 рази). Останнє може опосередковано свідчити про певні зміни в енергопостачанні міокарду. Позитивні зміни відмічались на ЕКГ та проявлялись зменшенням проявів ішемії.

Рис.9. Вплив екстракту “Локорин” на перебіг ізадринового міокардиту щурів.

Примітки:

1.*- відмінність достовірна по відношенню до інтакту (р£ 0,05);

2.** - відмінність достовірна по відношенню до контрольної патології (р£ 0,05);

3.*** - відмінність достовірна по відношенню до диклофенаку натрію (р£ 0,05).

Аналіз отриманих даних показав, що екстракт “Локорин” в цілому не поступається за кардіопротекторною дією диклофенаку натрію, а за деякими показниками (виживаність, зменшення вмісту ТБК-реактантів в 1,6 рази, ДК в 1,4 рази, активності АсАТ в 1,6рази, ЛДГ в 1,5 рази) навіть перевищує його. Виражена кардіопротекторна дія екстракту обумовлена наявністю у його складі флавоноїдів, оксикоричних кислот, кумаринів, дубільних речовин (Куцик Р.В., Зузук Б.М., 2002).

Однією з найголовніших характеристик субстанцій, які пропонують як перспективні для створення лікарських препаратів, є, поряд з вираженою фармакологічною активністю, їх безпечність. Отримані результати вивчення гострої токсичності при внутрішньошлунковому введенні щурам і мишам дозволили віднести досліджувану субстанцію до класу відносно нешкідливих речовин (ЛД50>15000 мг/кг) згідно з класифікацією токсичності речовин за Сидоровим К.К. (1973). При внутрішньоочеревинному введенні ЛД50 для мишей склала 4650 (3850-5460) мг/кг, для щурів − 4150 ( 3430-4880) мг/кг. Значення коефіцієнту видової чутливості, яке дорівнює 1,12, свідчить про її відсутність. Терапевтичний індекс екстракту “Локорин” складає більше 300, що характеризує значну широту терапевтичної дії і у 7 разів перевищує такий диклофенаку натрію. Екстракт “Локорин” не чинить ульцерогенної дії, не впливає на перистальтику кишечника та секреторну активність шлунка.


ВИСНОВКИ

1.         У скринінгових дослідженнях показана висока протизапальна, анальгетична та жарознижувальна активність екстракту “Локорин”. ЕД50 за протизапальною активністю на моделі карагенінового набряку становила 50 мг/кг.

2.         Установлені виражені протизапальні властивості екстракту “Локорин” на моделях гострого ексудативного запалення. Антиексудативна активність на моделі зимозанового набряку склала 59,9% і перевищувала таку на моделі гістамінового набряку. Екстракт “Локорин” виявляє антиліпооксигеназну активність, яка в 2 рази та 1,3 рази більша, ніж у диклофенаку натрію та кверцетину, відповідно. Протизапальний ефект обумовлений домінуючим впливом на пригнічення синтезу лейкотриєнів й помірним - на утворення ПГ. Висока антиексудативна активність екстракту (57,5%) у щурів з гострим перитонітом пов’язана з його можливістю перешкоджати деструкції клітинних мембран і гальмувати вивільнення маркерів інтоксикації.

3.         Показано, що екстракт “Локорин” не впливає на проліферативну фазу запалення.

4.         Доведена здатність екстракту “Локорин” на модельних патологіях “трафаретної рани”, спиртово-преднізолонової та індометацинової виразок шлунка виявляти потужну антиальтеративну дію (репаративну, противиразкову). При стандартному пошкодженні шкіри за планіметричними, біохімічними, а також гематологічними показниками він перевищує ефект диклофенаку натрію. За противиразковою дією екстракт “Локорин” (спиртово-преднізолонова виразка – 55,3%, індометацинова – 50,8%) знаходиться на рівні кверцетину.

5.         Встановлено, що в системі in vitro екстракт “Локорин” виявляє виразну антиокиснювальну активність, яка вища за активність a-токоферолу в 2,5 рази в умовах спонтанного і в 1,5 рази - аскорбатіндукованого ПОЛ. В умовах in vivo на моделі гострого тетрахлорметанового гепатиту у щурів екстракт “Локорин” проявляє антиоксидантну дію на рівні a-токоферолу. Установлена антиоксидантна дія екстракту “Локорин” обумовлює його мембраностабілізувальну, капілярозміцнювальну, гепатопротекторну та кардіопротекторну активності.

6.         Екстракт “Локорин” при внутрішньошлунковому введенні є відносно нешкідливою речовиною, не чинить місцевоподразнювальної дії, не впливає на функціональну активність ШКТ.


СПИСОК ПРАЦЬ, ОПУБЛІКОВАНИХ ЗА ТЕМОЮ ДИСЕРТАЦІЇ:

 

1. Набока О.І., Вороніна Л.М., Тимошенко О.П., Галузінська Л.В., Король В.В. Вивчення противиразкової активності сумарного комплексу БАР Лядвенця рогатого та його впливу на деякі біохімічні показники сироватки крові в умовах цієї патології // Лекарства – человеку: Сборник научных статей, г.Харьков. – 2002. – Т.17, № 1. – С.226-228. (Особистий внесок здобувача: проведення експерименту, участь в аналізі отриманих даних, підготовка статті).

2. Воронина Л.Н., Набока О.И., Галузинская Л.В. Влияние суммарного полифенольного комплекса “Локорин” на некоторые биохимические показатели сыворотки крови в условиях острого поражения слизистой оболочки желудка // Лекарства – человеку: Сборник научных статей, г.Харьков. – 2002. – Т.17, № 1. – С.54-56. (Особистий внесок здобувача: участь у проведенні експериментальних досліджень, аналізі отриманих даних, підготовка статті).

3. Воронина Л.Н., Тимошенко О.П., Набока О.И., Галузинская Л.В., Чумак Е.И. Влияние препаратов Лядвенца рогатого на заживление ран у крыс и изменения биохимических показателей в сыворотке крови в условиях данной патологи // Лекарства – человеку: Сборник научных статей, г.Харьков. – 2002. – Т.17, № 3. – С.135-137. (Особистий внесок здобувача: провів аналіз даних літератури, приймав участь у проведенні експериментальних досліджень, аналізі отриманих даних, підготовка статті).

4. Галузинская Л.В., Воронина Л.Н., Набока О.И., Кравченко А.Б., Таран С.Г., Сенюк И.В. Изучение гастропротекторной активности экстракта “Локорин” и его влияние на перекисное окисление липидов и антиоксидантную систему организма в условиях патологии // Лекарства – человеку. Современные проблемы создания, исследования и апробации лекарственных средств: Материалы Всеукраинской научно-практической конференции с международным участием, г.Харьков, 3 февраля 2005 г. – Х., 2005. – С.169-174. (Особистий внесок здобувача: участь у проведенні експерименту, аналізі отриманих результатів, підготовці статті до друку).

5. Вороніна Л.М., Галузінська Л.В., Набока О.І. Мембраностабілізуюча активність рослинного комплексу “Локорин” // Буковинський медичний вісник, Чернівці, 2005. - № 2 – С.51-53. (Особистий внесок здобувача: участь у проведенні експерименту, аналізі отриманих результатів, підготовці статті до друку).

6. Галузінська Л.В., Набока О.І. Вплив поліфенольного комплексу “Локорин” на перебіг запалення кінцівки щурів, викликаного різними флогогенами // Медична хімія. – 2005. – Т. 7, №4. – С. 91-93. (Особистий внесок здобувача: участь у теоретичному обґрунтуванні дослідження, проведенні експерименту, аналізі отриманих результатів, підготовці статті до друку).

7. Галузінська Л.В. Вивчення антиексудативної активності “Локорину” на моделі гострого перитоніту у щурів // Клінічна фармація. – 2005. – Т.9, №4. – С. 52--54.

8. Вивчення антиоксидантних властивостей екстракту “Локорин” в умовах in vitro та in vivo // Л.М. Вороніна, Л.В. Галузінська, К.В. Стрельченко // Клінічна фармація. – 2006. – Т.10, №1. – С. 40-44. (Особистий внесок здобувача: провів аналіз даних літератури, приймав участь у проведенні експериментальних досліджень, аналізі отриманих даних, підготовці статті).

9. Вороніна Л.М., Галузінська Л.В., Кравченко Г.Б., Набока О.І., Король В.В. Вплив екстракту “Локорин” на деякі біохімічні показники в умовах гострого ізадринового міокардиту // Медична хімія. – 2006. – Т. 8, №1. – С. 29-31. (Особистий внесок здобувача: приймав участь у проведенні експериментальних досліджень, аналізі отриманих даних, підготовці статті).

10. Галузінська Л.В., Вороніна Л.М., Набока О.І. Противиразкова активність екстракту “Локорин” на моделі НПЗЗ-індукованої виразки шлунка та його вплив на деякі біохімічні показники // Клінічна фармація. – 2006. – Т.10, №2. – С. 48-50. (Особистий внесок здобувача: провів аналіз даних літератури, приймав участь у проведенні експериментальних досліджень, аналізі отриманих даних, підготовці статті).

11. Воронина Л.Н., Тимошенко О.П., Набока О.И., Загайко А.Л., Галузинская Л.В. Биологическая активность и механизмы действия полифенольных растительных суммарных комплексов // Наука і соціальні проблеми суспільства: медицина, фармація, біотехнологія: Тези доповідей ІІІ міжнародной науково-практичної конференції – Х., 2003. – Ч.І. – С.70.

12. Вороніна Л.М., Галузінська Л.В., Набока О.І. Антиоксидантна дія екстракту “Локорин” на моделі спонтанного гемолізу еритроцитів у щурів // Перспективи створення в Україні лікарських препаратів різної спрямованості дії: Матеріали Всеукраїнського науково-практичного семінару, м. Харків, 26 листопада 2004 р. – Х., 2004. – С.480-484.

13. Вороніна Л.М., Галузінська Л.В. Антиоксидантна та мембраностабілізуюча дії екстракту “Локорин” на моделі тетрахлорметанового гепатиту у щурів // Клінічна фармація в Україні: Матеріали V Всеукраїнської науково-практичної конференції, м.Харків, 18-19 листопада 2004 р. – Х.:Золоті сторінки, 2005.-С.85.

14. Галузінська Л.В. Жарознижуюча активність екстракту “Локорин” на моделі молочної лихоманки у щурів // Розвиток наукових досліджень 2005. Матеріали міжнародної науково-практичної конференції. – Полтава, 2005. – С. 21-23.

15. Самброс С.С., Прохоренко О.В., Галузінська Л.В., Вороніна Л.М. Капілярозміцнююча дія екстракту “Локорин” // Актуальні питання створення нових лікарських засобів: Тези доповідей міжвузівської студентської наукової конференції, м. Харків, 27 квітня 2006 р. – Х., 2006. – С. 273.

16. Галузінська Л.В. Вивчення протизапальної активності “Локорину” на моделі трафаретної рани у щурів // Створення, виробництво, стандартизація, фармакоекономічні дослідження лікарських засобів та біологічно активних добавок. Тези доповідей ІІ Міжнародної науково-практичної конференції, м. Харків, 12-13 жовтня. – Х., 2006. – С. 175-177.

17. Пат. МПК А61К № 18309. Безвідходний спосіб одержання біологічно активних комплексів з Лядвенцю рогатого /Вороніна Л.М., Галузінська Л.В., Кисличенко В.С., Король В.В., Набока О.І..; Заявл. 27.03.2006; Опубл. 15.11.2006. (Особистий внесок здобувача: приймав участь у патентному пошуку, в підготовці опису до патенту).

18. Інформаційний лист №23-2007 “Використання субстанцій рослинного походження “Локорин” та густого екстракту з листя Винограду культурного для розробки гепатозахисних засобів”/Вороніна Л.М., Галузінська Л.В., Загайко А.Л., Файзуллін О.В. м. Київ, 2007.-3 с. (Особистий внесок здобувача: приймав участь в експериментальних дослідженнях, у патентному пошуку, в підготовці інформаційного листа до друку).


ГАЛУЗІНСЬКА Л. В. “Експериментальне вивчення протизапальної активності поліфенольного екстракту з надземної частини Лядвенцю рогатого”.- Рукопис.

Дисертація на здобуття вченого ступеня кандидата фармацевтичних наук за спеціальністю 14.03.05 – фармакологія.- Національний фармацевтичний університет, Харків, 2008.

Дисертація присвячена вивченню протизапальних властивостей поліфенольного екстракту “Локорин”. У скринінгових дослідженнях показана висока протизапальна, анальгетична та жарознижувальна активність екстракту “Локорин”. ЕД50 за протизапальною активністю на моделі карагенінового набряку становила 50 мг/кг. Протизапальний ефект на моделі зимозанового набряку обумовлений домінуючим впливом на пригнічення синтезу лейкотриєнів й помірним - на утворення ПГ. Доведена здатність екстракту “Локорин” на модельних патологіях “трафаретної рани”, спиртово-преднізолонової та індометацинової виразок шлунка виявляти потужну антиальтеративну дію. Показано, що в системі in vitro та in vivo екстракт “Локорин” виявляє виразну антиокиснювальну активність. Установлена антиоксидантна дія екстракту “Локорин” обумовлює його мембраностабілізувальну, капілярозміцнювальну, гепатопротекторну та кардіопротекторну активності. Екстракт “Локорин” при внутрішньошлунковому введенні є відносно нешкідливою речовиною, не чинить місцевоподразнювальної дії, не впливає на функціональну активність ШКТ.

Ключові слова: Нестероїдні протизапальні препарати, речовини рослинного походження, поліфеноли, Лядвенець рогатий.


ГАЛУЗИНСКАЯ Л. В. “Экспериментальное изучение противовоспалительной активности полифенольного экстракта с надземной части Лядвенца рогатого”.- Рукопись.

Диссертация на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук по специальности 14.03.05 – фармакология.- Национальный фармацевтический университет, Харьков, 2008.

Диссертация посвящена изучению противовоспалительных свойств полифенольного экстракта с надземной части Лядвенца рогатого под условным названием “Локорин”. В скрининговых исследованиях показана высокая противовоспалительная, анальгетическая и жаропонижающая активность экстракта “Локорин”. ЕД50 за противовоспалительной активностью составляла 50 мг/кг. Доказаны противовоспалительные свойства экстракта “Локорин” на моделях острого экссудативного воспаления. Антиэкссудативная активность на модели зимозанового отека составила 59,9% и превышала такую на модели гистаминового отека. Экстракт “Локорин” проявляет антилипооксигеназную активность, которая в 2 раза и 1,3 раза выше чем у диклофенака натрия и кверцетина, соответсвенно. Противовоспалительный эффект исследуемого экстракта обусловлен доминирующим влиянием на угнетения синтеза лейкотриенов и умеренным - на образование ПГ. Высокая антиэкссудативная активность экстракта (57,5%) у крыс с острым перитонитом связана с его возможностью препятствовать деструкции клеточных мембран и тормозить высвобождение маркеров интоксикации. Показано, что экстракт “Локорин” не влияет на пролиферативную фазу воспаления. Доказана способность экстракта “Локорин” на модельных патологиях “трафаретной раны”, спиртово-преднизолоновой и индометациновой язв желудка проявлять высокую антиальтеративную активность (репаративную, противоязвенную). При стандартном повреждении кожи по планиметрическим, биохимическим, а также гематологическим показателям он превосходит эффект диклофенака натрия. По противоязвенному действию экстракт “Локорин” (спиртово-преднизолоновая язва – 55,3%, индометациновая – 50,8%) находится на уровне кверцетина. Установлено, что в системе in vitro экстракт “Локорин” проявляет высокую антиокислительную активность, которая выше активности a-токоферола в 2,5 раза в условиях спонтанного и в 1,5 раза - аскорбатиндуцированного ПОЛ. В условиях in vivo на модели острого тетрахлорметанового гепатита у крыс экстракт “Локорин” проявляет антиоксидантное действие на уровне a-токоферола. Установленная антиоксидантная активность экстракта “Локорин” обуславливает его мембраностабилизирующую, капилляроукрепляющую, гепатопротекторную и кардиопротекторную активности. Изучение параметров острой токсичности экстракта “Локорин” позволило классифицировать исследуемый экстракт как “практически безвредный”. Установлено, так же, что исследуемый экстракт в дозе 50 мг/кг не оказывает ульцерогенного действия, не влияет функционирование желудочно-кишечного тракта.

Полученные данные служат экспериментальным обоснованием терапевтической эффективности препаратов на основе экстракта с надземной части Лядвенца рогатого при заболеваниях воспалительного генеза и позволяют предлагать исследуемую субстанцию в качестве потенциального противовоспалительного средства.

Ключевые слова: Нестероидные противовоспалительные средства, вещества растительного происхождения, полифенолы, Лядвенец рогатый.


GALUZYNSKA L. V. “Experimental research on antiinflammatory activity of polyphenol extract from overground Lotus corniculatus”. – Typescript.

The subject work is competing for the candidate’s degree in pharmaceutics, specialization 14.03.05 – pharmacology. – National pharmacy university, Kharkiv, 2008.

The thesis is devoted to investigation of pharmacological properties of polyphenol extract from overground Lotus corniculatus referred to as nickname “Locorin”. It has been identified that the investigated extract provides a wide range of pharmacological activities in dose of 50 mg/ kg. Antiinflammatory, analgesic, febrifuge, antioxidant, membrane stabilizing, capillary tonic, antiulcer, cardio/hepato protective and reparative effects have been proved as well. The “Locorin” extract has been proved to effect antiinflammatorily in dose of 50 mg/kg inhibiting alteration and exudation phases of inflammation. The researching of acute toxicity of the “Locorin” extract allows us to identify it as “nearly innocuous”. Besides it has been proved that the extract will not have ulcerogenic action in dose of 50 mg/kg whilst possess no influence on moving function of gastrointestinal tract and secretion of digestive juices.

Key terms: Nonsteroid antiinflammatory remedy, herbal-originated substances, polyphenols, Lotus corniculatus.

МІНІСТЕРСТВО ОХОРОНИ ЗДОРОВ’Я УКРАЇНИ НАЦІОНАЛЬНИЙ ФАРМАЦЕВТИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ ГАЛУЗІНСЬКА ЛЮБОВ ВАЛЕРІЇВНА УДК 615.322:577.127.4:615.212:615.276 ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНЕ ВИВЧЕННЯ ПРОТИЗАПАЛЬНОЇ АКТИВНОСТІ ПОЛІФЕНОЛЬНОГО ЕКСТРАКТУ

 

 

 

Внимание! Представленный Реферат находится в открытом доступе в сети Интернет, и уже неоднократно сдавался, возможно, даже в твоем учебном заведении.
Советуем не рисковать. Узнай, сколько стоит абсолютно уникальный Реферат по твоей теме:

Новости образования и науки

Заказать уникальную работу

Похожие работы:

Експериментальні дослідження ефективності тіотриазоліну за умов доксорубіцинової кардіоміопатії
Експериментально-морфологічне обґрунтування виникнення вторинних кровотеч з пошкоджених основних стовбурів сідничних артерій
Експрес-гастро-рН-моніторинг
Ендопротезування колінного суглоба у хворих на ревматоїдний артрит
Енергетика ізометричного скорочення скелетного м’яза білих щурів за експериментального гіпотиреозу і стимуляції адреналіном
Ентеральна недостатність в ранньому післяопераційному періоді у пацієнтів з гострою хірургічною патологією органів черевної порожнини
Естественные универсальные средства профилактики заболеваний и оздоровления организма
Етіологія, топічна діагностика та лікування інфекцій сечової системи
Ефекти, обумовлені введенням у клітини ссавців трансгена аполіпопротеїну А-1 людини
Ефективність інтервального гіпоксичного тренування в комплексному лікуванні виразкової хвороби у післярадикаційному періоді: вплив на аеробний метаболізм та варіабельність серцевого ритму

Свои сданные студенческие работы

присылайте нам на e-mail

Client@Stud-Baza.ru