База знаний студента. Реферат, курсовая, контрольная, диплом на заказ

 L[+]

 ш0

   дек. 1999г.

              2НЕСПЕЦИФИЧЕСКАЯ (ЕСТЕСТВЕННАЯ) ЗАЩИТА

   Неспецифическая защита включается немедленно после появления

патогенного агента.

   Формирование компонентов  неспецифической  защиты происходит

независимо от агрессии и  является  частью  развития  организма

(поэтому   их  называют  естественными  факторами  иммунитета).

/2800к/99/

    5Специфическая составляющая окончательно формируется  лишь  в

 5процессе ответа на агрессию,  что является содержанием  _адаптив-

 _ 5ного (т.е. приспособительного .) иммунного ответа. /2800к/99/

   Естественная резистентность включает, как минимум, 2 звена:

   1. Первый обусловлен механическими и биологическими барьера-

ми, нормальной микрофлорой,  ферментативными системами  клеток,

обеспечивающими разрушение и обезвреживание чужеродных агентов,

специфическими белками крови, фагоцитами, ЕКК, соответствующими

реакциями нервной  и эндокринной систем,  факторами свертывания

крови и т.д.  Большую роль в формировании антиинфекционной  ре-

зистентности играет  воспаление,  образование  в очаге молочной

кислоты и других ингредиентов с бактерицидными свойствами.

   2. Второй механизм индуцируется при парентеральном или перо-

ральном введении в организм чужеродной сыворотки, солевых раст-

воров,  высоко- и низкомолекулярных НК,  полисахаридов  и  др.,

что приводит к формированию так называемой  2тахифилаксии 0,  - по-

вышенной неспецифической устойчивости к патогенным агентам раз-

ной природы. Ключевым компонентом инфекционной тахифилаксии яв-

ляются фагоцитарные клетки. /2157к/97/

    4К неспецифическим факторам общего характера можно отнести

    4-  фильтрация  низкомолекулярных  гидрофильных токсинов через

 4базальную мембрану почек;

    4-  деструкция  гидрофобных токсинов в системе цитохромов кле-

 4ток печени (перевод в гидрофильную форму с последующей фильтра-

 4цией почками);

    4- быстрый  клиренс  ряда веществ и фрагментов деструкции па-

 4ренхимой почек, селезенки, печени;

    4- локальная активация свертывающей системы крови и окружение

 4инфицирующего агента фибриновой оболочкой (против чего ряд мик-

 4роорганизмов синтезирует фибринолизин);

    4- зона воспаления  с  отложениями  фибрина,  препятствующими

 4распространению микробов;

    4- отторжение некротических масс;

    4- деструкция чужеродного материала вместе с окружающей собс-

 4твенной тканью перекисными и радикальными соединениями кислоро-

 4да (т.е. сама воспалительная реакция)

    4- повышенное отделение слизи или экссудата, рефлексы кашля и

 4чихания;

    4- кислая рН (кожных покровов, секрета влагалища, желудочного

 4сока);

    4- мертвый слой эпителия на  поверхности  кожи  (механическая

 4непроницаемость);

    4- биоценоз толстого кишечника,  ротовой полости и др.  (мик-

 4робный антагонизм в отношении случайно попавшей микрофлоры);

    4- диарея;

    4- "биополе" (сетевое распределение сыпи,  микробов или, нао-

 4борот, их сосредоточение в локальной области  0── 76 4 прорыв и выве-

 4дение с некротическими массами в области локального воспаления)

    4[К факторам неспецифической защиты относят

    4- неспецифические протеазы (катепсины) лизосомальных фермен-

 4тов;

    4- эритрин  - вещество,  выделенное из эритроцитов с противо-

 4дифтерийными свойствами;

    4- лейкины - вещества,  освобождаюзиеся при разрушении лейко-

 4цитов;

    4- плакины - вещества, выделяемые тромбоцитами;

    4- абластин - фактор,  действующий на  возбудитель  сибирской

 4язвы;

    4- катионные белки, 0  4 белки острой фазы (БОФ);

    4- интерфероны и ингибиторы вирусов]

   - бактериофаги /?/

   Естественным механизмам защиты присущи элементы специфичнос-

ти. Так,

   - К-клетки действуют с помощью специфических антител. /2157к/97/

   - АТ-зависимый фагоцитоз и др. /2157к/97/

   Естественная резистентность свойственна всем видам животных,

обуславливает устойчивость к химическим,  физическим и биологи-

ческим агентам. По сути она не относится к иммунологическим ре-

акциям. /2157к/97/

.

                             - 2 -

                  2ЕСТЕСТВЕННАЯ ЦИТОТОКСИЧНОСТЬ

    3Эффекторные клетки 0 - ЕКК, макрофаги, полиморфоядерные лейко-

циты.

   ЕКК (естественные клетки-киллеры)  5= NK-натуральные киллеры =

 5NKK-натуральне клетки киллеры 0 - это нулевая субпопуляция лимфо-

цитов (0-лимфоциты) со следующими маркерами.

    5ЕКК представляют  собой популяцию больших гранулярных лимфо-

 5цитов с цитолитической активностью.  Осуществляют первую  линию

 5защиты,  уничтожая  опухолевые  клетки  или зараженные вирусами

 5собственные клетки.

    _Фенотип ЕКК .  5(маркерами ЕКК являются:)

   - CD16 - слабоаффинный Fc-рецептор для Ig G и/или

   - NCAM (гомолог CD56), и/или

   - CD57, который также известен как HNK1. /2289к/96/

    5Данные молекулы экспрессируются не только на ЕК-клетках,  но

 5и на других субпопуляциях лимфоцитов.

   - CD69   5экспрессируется  на  ЕКК  и  лимфокин-активированных

 5клетках-киллерах  после их стимуляции форболовыми эфирами (фор-

 5болмиристат ацетатом - ФМА),  ИЛ-2,  альфа-ИФ или антителами  к

 5CD16. /2289к/96/ 0

    5- На ЕКК  постоянно  экспрессируются  молекулы  адгезии  VLA

 51,2,4,5,6.  После  длительной  стимуляции ИЛ-2 экспрессия VLA-6

 5снижается.

    5В отличие  от Т- и В-лимфоцитов у ЕКК отсутствует экспрессия

 5CD3-антигена, Т-клеточного рецептора и иммуноглобулинов. 0

    _Субпопуляции ЕКК .:

   - c функцией цитолиза - СD16+/leu19+/CD3-

   - с цитотоксическими функциями - СD8+/Leu7+. /7388/92/

    3Клетки-мишени 0 (КМ):

   - опухолевые,

   - вирус-пораженные клетки (ВПК),

   - бактерио-пораженные клетки /?/.

   - трансплантированные клетки красного костного мозга.

    3Процесс узнавания (рецепторные структуры):

    _ЕКК лизируют клетки,  лишенные HLA 4I . 0.

   - За  негативное распознавание  2С 0-аллелей ГКГ (главного комп-

лекса гистосовместимости) отвечает белок  _р55-58 .. /2289к/96/

   - NKB1  ( _gp-70 . - гликопротеин 70кД) может быть определен как

негативный рецептор для аллелей  2В 051, 5801, 2702 ГКГ. /2289к/96/

    5Различные ЕК-клоны способны специфично лизировать определен-

 5ные аллогенные мишени,  и на основании этого  постулировал  су-

 5ществование репертуара  различных ЕК-клеток (уникальная способ-

 5ность лизировать определенные аллогенные клетки). /2289к/96/

   Для объяснения  роли  ГКГ 1 класса в процессе узнавания кле-

ток-мишеней ЕК-клетками, были предложены 2 теории.

   1) Гипотеза  "эффекторного  ингибирования" постулирует,  что │

 _HLA 4I .  0в  процессе  узнавания функционирует  _как негативный сигнал . │

для ЕК-клеток.  Поэтому клетки с низким уровнем экспрессии 4  0HLA 4I 0 │

(ГКГ 1) класса служат лучшими мишенями для ЕК-клеток.           │

   2) Теория "влияния мишени" предполагает,  что молекулы ГКГ 1

класса или  пептиды  могут  маскировать  структуры,  узнаваемые

ЕК-клетками, по типу конформационного ингибирования. /2289к/96/

   - ГКГ В-специфические рецепторы обеспечивают негативную сиг-

нализацию (CD94 или Кр43);  они представляют гомодимерные моле-

кулы  и  принадлежат ко второму типу лектиноподобных трансмемб-

ранных протеинов.  АТ к CD94-рецептору ЕКК способны нейтрализо-

вать  защиту аллелей В7,  В8 и В14 ГКГ (клетки начинают лизиро-

ваться ЕКК при стимуляции их ИЛ-2). /2289к/96/

   - CD44 (рецептор для гиалуроната) может усиливать спонтанную

и CD6-опосредованную АТ-ЗКЦ. /2289к/96/

   -  _Молекулы адгезии и протеины теплового шока . также могут вы-

полнять роль позитивных рецепторов дл ЕКК-клеток. ИЛ-2-стимули-

рованные ЕК-клетки    способны    распознавать    реорганизацию

ICAM-2-молекул на поверхности клеток-мишеней. /2289к/96/

   -- Лигирование  (=связывание)  бета-1-интегринов  антителами

или фибронектином может активировать ЕКК и усиливать их АТ-ЗКЦ.

Данные функции хорошо коррелируют с экспрессией  на  ЕК-клетках

 _рецепторов для внеклеточного матрикса .. /2289к/96/

    _ 3Механизм киллинга

    _ЕКК .  4(не один фактор) 0:  Запуск апоптоза в опухолевых клетках.

Предположителен выброс ионов кальция из кальмодулина и  наруше-

ние метаболизма.  4Са2+, ФНО-?, цитолизины /?/. Радикалы механизм

 4киллинга не опосредуют. 0  4Повреждение клеточных мембран с помощью

 4протеолитических ферментов азурофильных гранул. /2331к/97/ 0

                         7( 5- 7) 0- ЕКК

                        7╡╢╖╕╣

                        7║ 0ВПК 7╗

                        7╝╜╛┐└

                         79 0─ 70 0 - ЕКК

    _Макрофаги .: ПОЛ (МПХ),  лектин-зависимая цитотоксичность опу-

холевых клеток и микробов, ФНО, интрерферон.

                             - 3 -

    _Нейтрофилы . (противоопухолевая активность и  против  ВПК):  ?

(стимулируется активаторами).  Механизм не обусловлен метаболи-

тами АК:  радикалами кислорода, продуктами дегрануляции клеток.

/2319к,2320к/

    _Эозинофилы .: перфорины

    _ 3Регуляция

   - У детей появляется на 10-й неделе беременности; у новорож-

денных активность ЕКК достоверно ниже,  чем у взрослых и  прог-

рессивно возрастает вплоть до зрелого возраста.

    2С 3тимуляторы 2  0естественной цитотоксичности

   - бактериальные экстракты (стимулируют выработку ФНО, на 40%

повышают активность ЕКК). /6145/

   - ИЛ-2, лектины (пролиферация запускается лектинами и ИЛ-2).

/6145/

   --  4У  больных,  получавших  иммунодепрессанты (при пересадке

 4почек) частота опухолеобразования увеличивается в 350 раз. 0

   --  4У  детей  с врожденным иммунодефицитом частота злокачест-

 4венных опухолей возрастает в тысячу раз. 0 (Л 496 0) (Нет ИЛ-2)

   - Гистамин /6145/

   - Антитела к CD69 индуцируют пролиферацию  и  цитолитическую

активность и,  по-видимому,  действуют через активацию тирозин-

фосфорилазы. /2289к/96/

    3Ингибиторы

   - ИЛ-3  и др.

.

                             - 4 -

         2НЕЙТРАЛИЗАЦИЯ  ЧУЖЕРОДНЫХ  ВЕЩЕСТВ  ИЛИ  КЛЕТОК

           2РАЗЛИЧНЫМИ БИОХИМИЧЕСКИМИ КОМПОНЕНТАМИ

   2I. ПЕРЕКИСИ И РАДИКАЛЫ 0   (ПЕРЕКИСНОЕ И СВОБОДНОРАДИКАЛЬНОЕ

     ОКИСЛЕНИЕ липидов, белков, нуклеиновых кислот)

   Поскольку основным   субстратом  выступают  полиненасыщенные

жирнокислотные остатки мембранных липидов,  эти реакции принято

называть ПОЛ. /2372к-х/

   Кислород используется  в процессах окислительного фосфорили-

рования (примерно 90%) и на образование  активированных  кисло-

родных метаболитов (АКМ) - 0 42 5- 0,  Н 42 00 42 0,  ОН 5. 0,  НОСl,  RО 42 5. 0, NО 5. 0.

/7041/93/

   Окисление:

   - присоединение  кислорода│Источник - дыхание

   - отнятие водорода        │         - НАД.Н, НАДФ.Н

   - отнятие электрона       │         - ионы железа

   Механизм:

      Cu 52+ 0           >рН          1. МПХ, Сl 5- 0,иодирование

 Fe 52+ 0─── 76 5  0Fe 53+ 0                  ┌─────────── 76 0  ОСl 5- 0 + МДА

       е 5- 0       Н 5+ 0        Н 5+ 0    │ 2.

  О 42 0 ──── 76 0 0 42 5- 0 ─── 76 0 Н0 42 5- 0 ─── 76 0 Н 42 00 42 0 ─── 76 0 ОН 5. 0 + НООR ── 76 0 ОR 5.

           │      СОД          7% 0 │ 3.

           └──────────────────┘ └──────────────────── 76 0 Н 42 00

          (супероксиддисмутаза)  каталаза,пероксидаза-ПХ

                                 ГПХ: 2Г-SH + Н 42 00 42 0── 76 0 ГSSГ + Н 42 00

                                 недооксиленные продукты - ?

 Рис.   Схема перекисного и радикального окисления органического

        субстрата /R/ (липидов, белков, нуклеиновых кислот)

        1 и 3 пути метаболизма перекиси водорода - ферментативные,

        2 путь - неферментативный с образованием перекисей  ли-

                 пидов,  при  котором  антимикробная активность

                 перекиси  водорода может усиливаться под дейст-

                 вием аскорбиновой кислоты, йодидов, кислой

                 реакции среды.

О 42 0   - супероксид

О 42 5- 0  - супероксиданион

Н0 42 5- 0  4- протонированная форма

НО 5. 0   4- гидроксильный радикал

О 42 5. 0   4- синглетный  кислород (с параллельными спинами 2 электро-

         4нов)

    4Результат ПОЛ:

    4- рН повышается,

    4- окисление органического субстрата; перевод липидов в раст-

 4воримую форму.]

    4СОДаза предотвращает поражение тканей реактивными  оксипроиз-

 4водными в условиях кратковременной нехватки кислорода,  особенно

 4в ходе хирургических операций, когда нужно внезапно восстановить

 4ток крови. /1998г./

   Аскорбиновая кислота (аскорбат) взаимодействует с ионами ме-

ди, железа,  перекисью  водорода.  Способствует ПОЛ,  оказывает

бактерицидное действие.

   При недостаточности  МПХ  больные  восприимчивы

   - к кандидам и

   - стафилококковой инфекции (лечение антибиотиками). /7685/82/

   - клебсиеллам

   - кишечной палочке,

   - серрациям,

   - сальмонеллам

   - микобактериям,

   - аспергиллам

   - псевдомонас и др., имеющим каталазу. /2225к/

   ПОЛ сопровождается весьма слабой хемилюминесценцией. Хемилю-

минесценция подавляется цианидом, ЭДТА (связывают Fe 52+ 0), усили-

вается при  добавлении  ионов  Fe 52+ 0  в суспензию микросомальной

фракции. /2804к/

   Признак повышенного ПОЛ - блеск кожи /?/

    5(Руки светятся /блестят/ после стирки.)

   ───────────────────────────────────────────────────────────

              _Сущность свободнорадикальных реакций

   Согласно теории  свободнорадикального  (перекисного) окисле-

ния, сформулированной А.Н.Бахом, окисление органической молеку-

лы кислородом протекает по принципу цепного механизма.  Инициа-

торами окисления всегда выступают свободные радикалы -  частицы

                             - 5 -

имеющие неспаренный электрон (Х 5. 0).

   Свободные радикалы образуются под действием различных факто-

ров,  объединяемых  понятием  - _ прооксиданты. .  К прооксидантным

факторам относятся действие света, ультрафиолетового излучения,

ионизирующей радиации.  Прооксидантами являются соединения, са-

мопроизвольно распадающиеся с образованием свободных радикалов,

например диазосоединения. Свободные радикалы также образуются в

присутствии ионов переменной валентности  в  результате  одноэ-

лектронных окислительно-восстановительных реакций:

                   Fe 52+ 0 +  X  ──────── 76 0  Fe 53+ 0 +  X 5.

   В условиях живого организма важная роль в инициировании сво-

боднорадикальных  реакций принадлежит продуктам неполного восс-

тановления молекулы кислорода: 4_    5       4  5  4_   5          4 _     5        4  _

            e     5     4- 0  5  0e    5         0 e       5       0 e

        O 42 0 ────── 76 0 O 42 5. 0 ───── 76 0 H 42 0O 42 0 ──────── 76 0 HO 5. 0 ──────── 76 0H 42 0O

                       +2H 5+ 0         -H 42 0O          +H 5+

               суперокись   перекись     гидроксильный

               кислорода    водорода        радикал

   Образовавшиеся свободные радикалы вступают во взаимодействие

с молекулой окисляющегося органического вещества с образованием

радикала этого вещества ( 2реакция инициирования цепи 0):

                   X 5. 0  +   RH  ─────── 76 0   XH  +  R 5.

   Радикал R 5. 0  может реагировать с кислородом, образуя перекис-

ный радикал:        R 5. 0  +   O 42 0 ──────── 76 0   RO 42 5.

   Перекисный радикал, в свою очередь, реагирует с новыми моле-

кулами окисляемого вещества,  обусловливая цепной характер про-

цесса,  и превращается в гидроперекись ( 2реакция продолжения це-

 2пи 0):           RO 42 5. 0 +  RH ──────── 76 0   ROOH + R 5.

   Чередование двух  последних  реакций  лежит в основе цепного

характера окисления:

            O 42 0     4  0   RH      O 42 0      5  0 RH      O 42

             7^     4  7    ^       ^        5  7^       ^

        R 5. 0 ─── 76 0 RO 42 5. 0 ─── 76 0 R 5. 0 ─── 76 0RO 42 5.  0─── 76 0 R 5. 0 ─── 76 0RO 42 5. 0 и т.д.

                       7^                ^

                     ROOH             ROOH

   В присутствии металлов переменной валентности  гидроперекиси

распадаются с образованием новых радикалов:

               ROOH  +  Fe 52+ 0 ─── 76 0  RO 5. 0  +  OH 5- 0 +  Fe 53+

   Образовавшиеся новые радикалы инициируют появление новых це-

пей окисления ( 2реакция разветвления цепей 0) и процесс  окисления

приобретает самоускоряющийся, "взрывной" характер.

   Если бы свободные радикалы всегда реагировали только с новы-

ми молекулами органического вещества,  то один-единственный ра-

дикал рано или поздно превратил бы в перекиси все молекулы  ве-

щества. Однако в действительности этого не происходит и процесс

окисления рано или поздно останавливается.  Этому  способствуют

так называемые  2реакции обрыва цепи 0, в ходе которых радикалы ре-

агируют друг с другом,  с ионами переменной валентности  или  с

 2антиоксидантами 0 с образованием кинетически инертных молекул:

   а) R 5. 0 + RO 42 5. 0 ─── 76 0  RO 42 0R (молекулярный продукт)

   б) RO 42 5. 0 + Fe 52+ 0 + H 5+  0─── 76 0 ROOH (молекулярный продукт)+ Fe 53+

   в) RO 42 5. 0 + InH  ─── 76 0  ROOH + In 5. 0(малоактивный радикал)

   Реакция взаимодействия  радикалов  друг  с другом называемая

также реакцией диспропорционирования радикалов,  сопровождается

хемилюминесценцией - испусканием квантов света. Поэтому регист-

рация хемилюминесценции широко используется как метод  исследо-

вания  реакций  свободнорадикального окисления (Ю.А.Владимиров,

А.И.Арчаков, 1972).

   Между моментами появления и исчезновения свободного радикала

происходит несколько последовательных циклов реакций с участием

радикалов R 5. 0  и RO 42 5. 0, в результате чего на каждый появившийся в

системе радикал образуется  несколько  молекул  гидроперекисей.

Это  число характеризует  2длину цепи 0.  Длина цепи ограничивается

реакцией обрыва и сокращается в присутствии антиоксидантов, чем

и  объясняется их действие в качестве ингибиторов свободноради-

кальных процессов.

   В условиях клетки интенсивность реакций свободнорадикального

окисления во многом зависит от наличия  свободных  ионов  Fe 52+ 0,

поскольку  в окисленном или связанном состоянии железо неактив-

но.  Восстановление ионов Fe 53+ 0 в Fe 52+   0называется   2регенерацией

 2Fe 52+ 0.

  ─────────────────────────────────────────────────────────────

   Перекисное окисление обязательно в определенной степени про-

исходит в норме, выполняя следующие функции.

    _ 3Функции физиологические:

   1. обеспечивают деструкцию чужеродного материала в  фаголизо-

сомах; недостаток ПОЛ приводит к хроническому гранулематозу;

   - обеспечивает 50% гибель простейших и грибов /кандид/

      5(хлорированными и иодированными формами);

   2. инактивация ксенобиотиков (в цитохромах  Р-450  и  других

цитохромах эпс печени, в митохондриях печени и других клеток);

   3. обеспечивает разборку мембранных структур в процессе реге-

нерации (ионы  переменной  валентности  (титан,  железо,  медь,

цинк) ускоряют заживление ран /1699к/83/),

                             - 6 -

   4. регуляция вязкости мембраны (через метаболизм арахидоновой

кислоты=АК);

   - участвуют в метаболизме  арахидоновой кислоты;

   5.  4роль в онтогенезе и клеточной пролиферации;

    4- регуляция функций лимфоцитов;

    4- регуляция тонуса сосудов.

    4Почти при  каждой  патологии  наблюдается интенсификация ПО.

 4Хотя есть и такие состояния,  которые характеризуются снижением

 4уровня ПО, например, в межприступный период астмы.

    _ 3Функции патологические .:

   1. ПОЛ опосредует механизм деструкции

     (-- ксенобиотиками,)

     -- при ишемии и реперфузии,

     -- в очаге воспаления (поражение тканей,  органов, клеток,

        молекул).

   Дисбаланс в  системе "АКМ (=активированные кислородные мета-

болиты)-антиоксиданты" получил название "окислительного  стрес-

са". /2220к/97/

   2. ПОЛ участвует в атерогенезе, старении. /7041/93 и др./

   3. Мутагенный, онкогенный эффект.

   4. Повышение проницаемости мембран клеток  для  ионов  может

привести клетку к функционально неактивному состоянию.

   5. Белки, поврежденные радикалами, запускают ИО. /7957/91ин./

   Наиболее вероятными  источниками  активированных кислородных

метаболитов при ишемии являются ПМЛ, ксантиноксидазная система,

митохондриальное дыхание,  катаболизм АТФ,  процессы деградации

АК, аутоокисление катехоламинов,  реакции, иницированные ионами

металлов переменной валентности. /2220к/97/

   Свободнорадикальная патология:  авитаминоз E,K, беломышечная

болезнь. /7041/93/

───────────────────────────────────────────────────────────────

   ПО повышается при              │ ПО снижается при

 ───────────────────────────────────────────────────────────────

   - гипероксии (статус эпилепти- │ - раке,

     кус, легочная дисплазия ...) │ - хроническом гранулематозе

   - гипоксии, реоксигеназный     │   (недостаточности МПХ)

     парадокс (восприятие нормаль-│ - в межприступный период

     ного уровня кислорода как    │   бронхиальной астмы

     избыточного)                 │ - трисомии 21 (ген СОД в 21

   - интенсивной мышечной деятель-│   хромосомы, поэтому его

     ности                        │   синтезируется на 50% боль-

   - старении,                    │   ше нормы (синдром Дауна -

   - воспалительных процессах     │   дети гибнут от инфекции

     (острых и хронических)       │   из-за недостаточности ПО)

   - воздействии радиации         │ - избытке витамина Е

   - курении                      │

   - химических отравлениях       │

     (ССl 44 0,паракватом,различными  │

     канцерогенами - бензпиреном  │

     и др.                        │

   -- лекарственной гемолитической│

     анемии (фенилгидразиновой..) │

   - дефиците витаминов Е и А     │

   - при наркоманиях              │

     (морфин, 10 5-6 0М) /2319к/      │

                                  │

                                  │

───────────────────────────────────────────────────────────────

   - симптом каменного сердца (не отвечает на раздражители)

    5Под действием оксидантов в В-клетках повышается фосфорилиро-

 5вание по тирозину (тирозиновая протеинкиназа). /2228к/

    4Гипоксия и  ишемия  являются  универсальными патологическими

 4процессами, нарушающими метаболизм и функции клетки  при  боль-

 4шинстве критических состояний.  Независимо от причин гипоксии и

 4ишемии, в основе нарушений лежат дефицит энергопродукции и  ак-

 4тивация процессов  ПОЛ.  Возникает  своеобразный порочный круг:

 4недостаток кислорода нарушает энергетический обмен и стимулиру-

 4ет свободнорадиальные процессы в клетке,  а активация свободно-

 4радикального окисления ведет к повреждению мембран  митохондрий

 4и углубляет энергетический дефицит. /7956/96/

                    5Регуляторы ПОЛ /7041/93/

 5──────────────────────────────────────────────────────────────

        5ОКСИДАНТЫ             │        АНТИОКСИДАНТЫ

        5ИНДУКТОРЫ             │

 5───────────────────────────────────────────────────────────────

    5Ионы 2-валентного железа  │ I. ГИДРОФОБНЫЕ

    5медь                      │    - токоферол (витамин Е)

    5МПХ 0                        5│    - каротин, витамин А

    5кислород (гипероксия) 0      5│    - насыщенные ЖК

   озон                       5│ 0     5- ЛПВП 0  5(2368к)

   диоксид азота              5│    - холестерин

                             - 7 -

   эндопероксиды              5│II. ГИДРОФИЛЬНЫЕ

   ФАТ, ИЛ-1, ФНО ── 76 0 АК      5│ 1. Ферментативные

    5ионизирующая радиация 0      5│   - каталаза, ПХ,СОД

    5УФ облучение 0               5│   - селен-содержащие ГПХ,

    5загрязнители воздуха 0       5│     глутатионтрансферазы

    5(ксенобиотики)  0            5│ 2. SH-содержащие соединения

    5свободные радикалы табач- 0  5│    (тиоловые соединения)

              5ного дыма 0        5│   - цистеин, цистин, метионин

    5некоторые химические ве- 0   5│   - тиолы, восстановленный

              5щества пищевого 0  5│     глутатион

              5рациона 0          5│   - трипептид (цис-глу-гли)=GSH

                              5│ 3. Соединения, содержащие

                              5│    енольные группы

    5Стимуляторы ПОЛ: 0           5│   - аскорбиновая кислота - ?

 5- цисполиеновые ЖК 0            5│   - фенольные антиоксиданты

 5- детергенты и сурфактанты 0    5│ 4. Хелатные соединения

 5- лектины 0                     5│    (связывающие металлы

 5- АТ (ИК) 0                     5│    переменной валентности)

 5- компоненты комплемента 0      5│   - ферритин,

   5(опсонины) 0                  5│   - трансферрин,

 5- хемотаксические факторы 0     5│   - лактоферрин,

 5- опсонины  0                   5│   - церулоплазмин,

 5- форболмиристатацетат /7531/│ 5. Другие

                              5│   -  _этанол

                              5│   - гепарин

                              5│   - молочная, лимонная кислоты-?

                              5│   - мочевая кислота,

                              5│   - некоторые пептиды

                              5│ 0    5- селен

                              5│ Антигипоксанты

                              5│   - гутимин,

                              5│   - амтизол

                              5│   - триметазидин /7956/96/

                              5│ Актопротекторы (усиливают

                              5│ синтез белков, в т.ч. и анти-

                              5│ оксидантов /7956/96/

                              5│   - бемитил

                              5│   - этомерзол

                             │ 5 Гистидин (является  "уборщиком"

                             │ 5 гидроксильного радикала   /2319к/

                             │ Ниацин /?/

                             │ Глютатион-S-трансфераза

                            5трансферрин, ферритин

                            5церулоплазмин

                           гемопексин

                           гаптоглобин

 5───────────────────────────────────────────────────────────────

   При дефиците токоферола (витамина Е) развиваются тяжелые по-

ражения тканей (некротические очаги в печени,  мышечная дистро-

фия, гемолиз эритроцитов в крови, поражение нервной ткани, сте-

рильность гонад).

   И наоборот, повышение концентрации антиоксидантов может выз-

вать рецидив  инфекционного  воспаления  (подавление деструкции

фагоцитируемого материала ── 76 0 незавершенный фагоцитоз).

    _Селен .. Биологическая роль селена обусловлена его  включением

в состав антиоксидантных ферментов:  ГПХ, фосфолипидгидроперок-

сидглютатионпероксидазы и  фосфолипидгидропероксид  ГПХ.  Селен

входит также в состав 5'-иодотирониндеиодиназы.  Уровень селена

снижается при ревматоидном артрите. /2240к/95/

     5МЕХАНИЗМ

    51. Ферментативное

       5- включается в нормальный метаболический процесс (в учас-

 5тием НАДФхН

    52. Неферментативное

       5- использует в качестве восстановителя железо и  аскорби-

 5новую кислоту.

.

                             - 8 -

    2II. НУКЛЕАЗЫ (ФИА - ФАКТОРЫ, ИНДУЦИРУЮЩИЕ АПОПТОЗ)

   Нейтрофилы секретируют факторы,  индуцирующие апоптоз разных

клеток-мишеней ( _ 2апоцитоз . 0 окружающих  клеток).  В  свои  вакуоли

нейтрофилы выделяют фактор,  индуцирующие апоптоз (ФИА) клеток,

которые разрушают геном микробов. Это ферменты с высокой нукле-

азной активностью ( _нуклеазы .). При массивном проникновении в ор-

ганизм инфекционных агентов нейтрофилы активно поглощают микро-

бы и,  не заботясь об их истинном переваривании,  выбрасывают в

межклеточное пространство значительные количества ФИА. Цель ре-

акции  -  произвести  в сжатые сроки как можно более выраженное

 _повреждение генетического аппарата микробов .. ФИА губительны для

всех клеток:  они способны осуществить деградацию НК генома лю-

бых биосистем - эукариот, прокариот, вирусов. Нейтрофильные ФИА

индуцируют ускорение апоптоза и у самих нейтрофилов. /2226к/97/

   Фагоцитоз и апоцитоз - разные,  но функционально сопряженные

процессы.  Нейтрофилы с помощью ФИА  инициируют  воспалительную

реакцию.  Процесс  воспаления  -  это реакция организма на ФИА.

/2226к/97/

   Нейтрофилы - это клетки,  у которых включена генетически за-

данная программа  клеточной гибели.  На поверхности нейтрофилов

по прошествии некоторого времени появляются структуры,  которые

обусловлены апоптозом  и  которые  узнаются  макрофагами (САН -

структуры апоптоза нейтрофилов). Фагоцитоз "старых" нейтрофилов

осуществляется макрофагами. /2226к/97/

     2III. ФАКТОР НЕКРОЗА ОПУХОЛЕЙ 0 (ФНО=TNF)

        (6490,6493,6501/89;9-53-530-91)

   В конце  ХIХ  века  американский ученый Уильям Коле заметил,

что инфекционный процесс у больных опухолями ведет к  регрессии

и даже исчезновению опухолей. Это наблюдение использовали затем

для лечения опухолей путем преднамеренного заражения слабопато-

генными микроорганизмами  (стафилококком,  ослабленным  штаммом

энтеровирусов и др.) Лечебным эффектом обладала также сыворотка

инфекционых больных. /1318/90/ В 1851г. Latour лечил опухолевые

заболевания введением живых трепонем, а Busch - инъекциями воз-

будителя рожи.  В начале ХХ века Adam и Much начали применять в

лечении  опухолевых и инфекционных заболеваний лизаты,  белки и

липиды ряда бактерий. /2341к/94/

   Это дало  повод к поиску антитуморогенного фактора.  ФНО был

обнаружен в 1975г. Карсвеллом.

   Альфа-ФНО - синтезируется многими клетками (в т.ч.  макрофа-

               гами = кахектин)

   бета/?/ -ФНО  - продукт только Т-лимфоцитов (= лимфотоксин -

               альфа и бета).  /1666к/94,2283к/96, 2460к/95//

(Белки гомологичны на 30-50% по первичной структуре /7471/.)

    _Биохимия

   М. кахектина 17кД /6496/90,7471/; три идентичные субъединицы

/6498/. Предполагается, что металлопротеин. /2376к/ (Синтезиру-

ется как прогормон, встраивается в мембрану, затем выделяется.)

   Альфа и бета-ФНО имеют общий рецептор. /1666к/94/

   Количество рецепторов к альфа-ФНО на 1 нейтрофиле составляет

2-6 тысяч при 4 5о 0С и около 600 при 37 5о 0С (деградирует-?). /2273к/

    4Механизм активации ФНО протеинкиназы С: 0  4ФНО  0── 76 4 рецептор для

 4ФНО  0── 76 4 активация фосфолипазы С  0── 76 4 гидролиз ФХ  0── 76 4 фосфорилхо-

 4лин и ДАГ (увеличение уровня 1,2-диацилглицеролаз /ДАГ/  (через

 415с.)  0── 76 4 активация протеинкиназы С. /2366к/91/

    _Синтез

   В норме ФНО обнаружен только  2в фагоцитах  0(макрофагах и нейт-

рофилах) 4. ФНО  синтезируется у больных артритом 0  4мононуклеарными

 4клетками синовиальной жидкости /6494/;  в ткани легких  больных

 4туберкулезом  (при  туберкулезе и фиброзе в клетках эндотелия);

 4астроцитами под действием ЛПС /6493,7637/91/, ЭК (под действием

 4ЛПС  лейкоциты прилипают к поверхности ЭК и проникают через эн-

 4дотелий; ФНО локализуется на поверхности мембраны). /7585/92/ 0

   Стимуляторы синтеза - эндотоксины (ЛПС и др.-?). ИЛ-1-?

    4Гены в районе НLА III класса (6 хромосома).

    _ 2Биохимические свойства и выполняемые функции

    3Социальный уровень

    5При введении животным ФНО развивается  картина,  характерная

 5для септического  шока  (повышается  температура /опосредованно

 5через ИЛ-1-?/, развивается тахикардия, повышается уровень адре-

 5налина,  снижается количество лейкоцитов).(ЖМЭИ-94-N3; 6488/87/

 5ФНО увеличивает сосудистую проницаемость  за  счет  образования

 5щелей между ЭК. (ЖМЭИ-94-N3-С.119)

    5При развитии толерантности к ФНО развивается толерантность и

 5к эндотоксину.  /6488/ Иммунизация ФНО животных приводит к сни-

 5жению летальности;  Летальный исход удается затормозить АТ-ми к

 5ФНО. (ЖМЭИ-94-N3-119)

   -  _Вызывает  лихорадку .  /1666к/94/,  наиболее ранний цитокин,

выделяющийся при индикации сепсиса. /2359к/

    _Введение здоровым  лицам .  ФНО  приводит  к  повышению на 30%

энергозатрат организма (через ЦО-ую систему); механизм блокиру-

                             - 9 -

ется ибупрофеном.  Развивается  гипогликемия через 2 часа после

введения, липолиз (мобилизация ЖК из жировой ткани  ── 76 0  печень

── 76 0 синтез /?/),  повышается протеолиз в мышечной ткани, усили-

вается синтез белка в печени. /2359к/93/

    _Системное введение 7 a 0-ФНО . животным (0,6 мг/кг) приводит к це-

лому ряду пуатологических состояний /7638/:

   - ацидозу,

   - диарее /7638/92/,

    5- нейтропении 0,

   - отеку легких /2292к/,

   - гипотонии (падению АД),

   - шоку  (ФНО  и  эндотоксин  синергически активируют систему

     комплемента,  вызывают шок и повреждение толстого кишечни-

     ка; дефицит С5 предотвращает шок /6168/91/).

   У человека длительная выработка ФНО может привести к

- учащению дыхания (тахипноэ) [через активацию метаболизма ара-

  хидоновой кислоты и повышенный синтез лейкотриенов /6497/],

- истощению белков и липидов,

- анемии,

-  _кахексии . при персистирующей продукции /6501/,

- к  летальному исходу,  поэтому ФНО называют "летальным факто-

  ром".

    3Организменный уровень

    _Уровень альфа-ФНО повышается при

   - инфаркте миокарда,

   - вирусном гепатите,

   - роже,

   - инфекционном мононуклеозе,

   - иерсиниозе,

   - менингите (опосредует эндотоксический шок),

   - сепсисе,

   - трихинеллезе. /7955/92/

   - при коллагенозах,

   - у больных с грибовидным микозом,

   - при миеломной болезни  /2376к/,

   - уровень ИФ коррелирует с тяжестью СПИДа.

   - при псориазе (реакция на суперантиген кожи) /2376к/

    5ФНО-альфа является ключевым цитокином при псориазе. Считают,

 5что псориатические  поражения начинают образовываться под влия-

 5нием ИЛ-1 и альфа-ФНО,  синтезируемых кератиноцитами, активиро-

 5ванными под влиянием внешних факторов. /1666к/94/

    _Уровень ФНО снижается

   - при тяжелом атопическом синдроме. /2376к/

    _Свойства

   1) Стимуляция иммунитета хозяина (организма). /7827/93/

   2) Снижение кровяного давления. /2292к/

   3) Шок. /2292к/

    3Системный уровень

   1) Пирогенность (прямое действие на гипоталамус). /2292к/

   2) Усиливает ангиогенез. /1666к/

   3) Стимулирует лейкопоэз (нейтрофилов). /2292к/

    3Тканевой/органный уровень

   1.  1Цитотоксическое/цитостатическое действие на  _опухоль . 0.

   Механизмы:

   - ФНО-альфа  вызывает  фрагментацию  ядерной  ДНК опухолевых

клеток,  а ИЛ-1 убивает опухолевые клетки с рецепторами к нему.

/2348к/95/

    4(ИЛ-1 способен самостоятельно убивать меланому А  375.  Воз-

 4можно, через  ИЛ-1  осуществляется естественная цитотоксичность

 4моноцитов. /5694/87/)

    4Сходство с ИЛ-1 (по-видимому,  из-за сходства индуцирующихся

 4ими цитокинов) /7472/:

 4- цитоцидный эффект на клетки некоторых опухолей;

 4- индуцируют повышение температуры тела;

 4- стимулируют продукцию хемотаксического  фактора  (NAP-1)  для

   4нейтрофилов  моноцитами  и  фибробластами человека;

 4- вызывают воспаление,  фиброплазию,  ангиогенез;

 4- сходно воздействуют на эндотелиальные клетки /ЖМЭИ-94-N3-С.110-114/

 4- индуцируют  экспрессию  рецепторов к ИЛ-2,  образование ИЛ-6,

   4колониестимулирующих факторов, БОФ;

 4- радиопротекторные свойства

   - Через ИФ.

    4Ряд опухолевых клеточных линий чувствительны к действию  од-

 4ного ФНО,  другие - к совместному действию с гамма-интерфероном

 4(лимфоцитов).  Часто усиление злокачественности опухолевых кле-

 4ток коррелирует с увеличением чувствительности к ФНО.  Нетранс-

 4формированные клетки не чувствительны даже к  комплексу  с  ИФ.

 4/6490/ ФНО - индуктор дифференцировки клеток-опухолей. /6499/

   - Через тромбопластин ЭК.

   Альфа-ФНО повышает экспрессию тканевого фактора, что повыша-

ет коагуляционный потенциал в местах воздействия.  В ткани фиб-

росаркомы  (мышей)  ФНО  приводит  к свертыванию крови (выбросу

                            - 10 -

тромбопластина) и тем самым к противоопухолевому эффекту. /0041/

Деструкция сосудистой цепи опухолей.  /7827/93/  4Прокоагулянтная

 4активность блокировалась моноклональными антителами к тканевому

 4фактору. /0041/

   - Через ЕКК. Усиливает активность ЕКК. /2157к/

   2) Стимуляция синтеза БОФ (активация гепатоцитов). /2292к/ В

то же  время  ИЛ-1  и  ФНО-альфа подавляют синтез некоторых БОФ

(фибриногена, гаптоглобина), индуцируемых ИЛ-6. /2294к/95/

    3Клеточный уровень

   1. ВПК (вирус-пораженные клетки).

   Принимает участие в  1уничтожении клеток,  зараженных вирусами

везикулярного стоматита и простого герпеса,  по-видимому, инду-

цируя продукцию ИЛ-6.

   2. Подавляет размножение трипаносом, малярийного плазмодия.

   3.  _Лейкоциты ..

   - Активирует лейкоциты (макрофаги, лимфоциты).

   Усиливает продукцию макрофагами ИЛ-1,  ИЛ-6, ИЛ-8, ФАТ, лей-

котриенов /ЛТ/, ТХ А2, простагландинов /Pg/.  4Аутокринная секре-

 4ция. 0 /2292к/

   - Оказывает  иммуностимулирующее действие на Т- и В-лимфоци-

ты,  ЕКК. Стимулирует синтез АТ в культуре клеток. /2283к/

   Стимуляция ГЗТ (образование гранулем). /2292к/

   - Стимуляция фагоцитирующих клеток. /2283к/

    5Повышает естественную резистентность за счет активации  мак-

 5рофагов и гранулоцитов , повышения кислородного метаболизма фа-

 5гоцитов. /7073/

   - Стимулирует   фагоцитоз,  активирует  АТ-ЗКЦ  нейтрофилов.

/2273к/

    5- Влияет на активность нейтрофилов  (хемотаксис,  адгезию  к

 5ЭК, секрецию перекиси водорода; освобождение лактоферрина), эо-

 5зинофилов, Т- и В-лимфоцитов, ЭК. /6499/

    5- Индукция экспрессии различных молекул адгезии, Fc-рецепто-

 5ров, АКТГ,  онкогенов /6496/;  стимуляция  продукции  цитокинов

 5(ИЛ-1,6, ксф), . /6496,7173/

   4.  _ЭК.

   - Повышение адгезивности ЭК (усиление экспрессии  адгезивных

молекул),  нейтрофилов,  эозинофилов, базофилов, моноцитов и (в

меньшей степени) лимфоцитов. /2292к/95/

   - Стимуляция экспрессии тромбопластина ЭК-ми. /2292к/95/

   - Повышение проницаемости сосудов  (прямая  токсичность  для

эндотелиальных клеток). /2292к/95/

   - Повышает экспрессию АГ-ов ГКГС классов I и II на ЭК и фиб-

робластах. /1666к/

   4. Индуцирует синтез ИЛ-1,6,8,  ВПМ-1, ТФР-альфа в культиви-

рованных  _кератиноцитах .. /1666к/ Активный синтез ФНО-альфа в ко-

же связывают с процессами реэпителизации. /2376к/

   5. Стимулятор  синтеза   1коллагеназы 0   _синовиальными  клетками

/6490/86/,   _фибробластами . /6494/89/. ───── 76 0 резорбция костной и

хрящевой ткани.  Стимуляция роста фибробластов. /6490/ Способс-

твуют обновлению костной и хрящевой ткани.

   ФНО-альфа стимулирует  ангиогенез  и увеличивает митогенез и

инвазивную миграцию фибробластов (физиологическая  роль  ФНО  в

регуляции процесса заживления ран). /2376к/

   Повышает экспрессию  АГ-ов ГКГС классов I и II на фиброблас-

тах. /1666к,7638/92/

   6.  _Жировые клетки . (подавление активности липопротеинлипазы и

метаболизма жировых клеток). /2292к/

   7. Клетки  _мышц . (снижает мембранный потенциал,  ослабляет сок-

ратительную активность кардиомиоцитов; истощение энергетичекого

потенциала мышечных клеток). /2292к/

   8. ФНО-альфа регулирует пролиферацию и дифференцировку гемо-

поэтических предшественников. /2376к/

    3Субклеточный уровень

   1.  1Активатор ПОЛ 0, что приводит к повреждению тканей и разви-

тию воспалительной реакции.  ФНО - медиатор в патогенезе инфек-

ционного  воспаления.  Например,  при  септицемии   наблюдается

сверхпродукция  ФНО с последующим поражением сердца,  сосудов и

других органов,  развитие септического шока. Уровень ФНО значи-

тельно повышен при септицемии, а также у больных СПИДом./7073/

   ── 76 0 Бактерицидный эффект

   ФНО (и  КСФ)  усиливает  продукцию  супероксидных  радикалов

(О 52- 0) и хемотаксис нейтрофилов /2360к/94/ особенно в  ответ  на

С5а и FMLP (f-met-leu-phe).   5Однако цитокин не усиливал генера- 0 │

 5цию радикалов при стимуляции нейтрофилов форбол миристат ацета- 0 │х

 5том. 0 /2364к/92/                                                 │

   2. Альфа-ФНО,  лимфотоксины  альфа и бета используют один ре-

цептор. Функциональная неполноценность или недостаток рецепторов

к ФНО вызывает выраженный иммунодефицит (ИД). Мыши при этом при-

обретают высочайшую чувствительность к инфекции Listeria monocy-

togenes. /2460к/ Вместе с тем приобретается резистентность к ле-

тальному действию ЛПС (липополисахарида  Г-  бактерий).  Делеция

гена  рецептора приводит к  4полному отсутствию ЛУ в организме 0 де-

фектного животного, резистентности к летальному эффекту ФНО-аль-

фа,   отсутствие  кожной  реакции  на  интрадермальное  введение

                            - 11 -

ФНО-альфа. /2460к/

   2. Противовирусная активность. /2283к/

    3Биохимический уровень

   1. Активатор метаболизма  1арахидоновой кислоты  0с образованием

простагландинов (Pg E 42 0 ── 76 0 иммунодефицит) и лейкотриенов.

   -  Стимулирует синтез Pg E2 клетками передней доли гипофиза.

/7774/88/

   2.

   - повышает экспрессию АГ-ов ГКГС классов I и II на ЭК и фиб-

робластах,

   - индуцирует синтез ИЛ-1,6,8, ВПМ-1, ТФР-альфа в культивиро-

ванных кератиноцитах. /1666к/

   3. Активирует NO-синтетазу,  вызывающей образование NO-реак-

тивных метаболитов. ИЛ-10 ингибирует NO-синтетазу. /2294к/95/

    3Физический уровень

   Обладает радиопротективными свойствами. /7472/

    _ 4Регуляция

    4[Система ФНО включает

 4- 2 лиганда (альфа- и бета),

 4- два рецептора (к альфа и к бета),

 4- два ингибитора - ФНО-связывающие протеины I и II./7470/91/

    4Рецептор к  ФНО  входит в семейство рецепторов фактора роста

 4нервов, антигенов лимфоцитов (ОК-40-Т-лимфоциты, СД-40-В-лимфо-

 4циты). Рецептор  имеется  на миелоидных клетках,  эпителиальных

 4клетках, на клетках плаценты, легочных фибробластах; в сыворот-

 4ке больных раком. /6503/]

    2IV. ФИБРОНЕКТИНЫ

   (от слов "fibra" - волокно; "necter" - cвязывать; с англ.)

   Это белки - "мусоросборщики" (представляющие собой  "контей-

нер для мусора").

    _Биохимия

   Группа нерастворимых на холоду гликопротеинов с М.400-450 кД.

   Димеры (с М. по 220 кД).

    45% молекулы - углеводная часть (в т.ч.  манноза,  галактоза,

 4N-ацетилглюкозамин, сиаловые кислоты).

   Концентрация - 300 мг/л. Содержание увеличивается при воспа-

лении и  уменьшается  (вторично)  при  инфекционных процессах и

сепсисе,  хирургических  вмешательствах,  ТГС-синдроме,  ожогах

вследствии  повышенного потребления.  Концентрация фибронектина

после его тотального удаления восстанавливается  через  2  дня.

Стабильно  низкий уровень фибронектина ассоциирован с неблагоп-

риятным прогнозом заболевания.

    4[До одного года концентрация фибронектинов у  детей  низкая,

 4затем  достигает  уровня  взрослых  и остается стабильной до 15

 4лет.  С возрастом концентрация увеличивается примерно в полтора

 4раза.]

   Делятся на  1растворимые 0 (циркулирующие в виде димеров) и   1не-

 1растворимые 0, соредоточенные в соединительной ткани.   4Располага-

 4ются на поверхности клеток  соединительной  ткани  и  базальной

 4мембраны и в экстраклеточной жидкости мезенхимальных тканей. 0

    _Функции

   1. Опсонин,   обуславливая  фибронектин-зависимый  фагоцитоз

(участвует в очищении  раневой  поверхности  и  воспалительного

очага). Удаление фибронектина из крови приводит к  снижению  ее

фагоцитирующих свойств в 2 раза.   5Рецепторы к фибронектину име-

 5ются на макрофагах и нейтрофилах. /7061/ 0

   Фибронектины связывают гликопротеиды

- стафилококков (St.aureus),

- стрептококков (группы А,С,G),

- трепонемы паллидум /2745к/,

- дрожжей, кандид,

- вирусов - гриппа, парагриппа, паротита),

- строму клеток, актин, коллаген, ДНК, фрагменты тканей,

- иммунные комплексы,

- гепарин, желатин, ионы кальция, компоненты С3 и С1q.

    4[Тейхоевые кислоты Г+ бактерий микробов ингибируют  связыва-

 4ние фибронектина с микробами, исключая перечисленные.]

   2. Регулирует адгезию и пролиферацию  мигрирующих  клеток  и

эндотелиальных клеток;

   3. Регулирует образование соединительной ткани: после травмы

откладывается в местах повреждения вдоль нитей фибрина  (синте-

зируемый эндотелиальными  клетками и фибробластами);  формирует

криопреципитаты (фибронектин-фибрин) при ревматоидном  артрите,

системной красной волчанке, системном склерозе;

    _Синтез

   Синтезируются гепатоцитами,  фибробластами,  эндотелиальными

клетками (+ макрофагами,  нейтрофилами,  тромбоцитами, миоцита-

ми).

.

                            - 12 -

    2V. БЕЛКИ ОСТРОЙ ФАЗЫ 0 (БОФ; = адаптивные белки)

    4[Острое активное воспаление длится до 2 недель;  хроническое

 4- более 1,5 месяцев.  Для острого воспаления более типичны экс-

 4судативные реакции, для хронического - пролиферативные./420/]

   БОФ включают белки, содержание которых резко меняется в ост-

рую фазу воспаления:

   -  2"негативных" 0 снижается (преальбумин,  альбумин,  трансфер-

             рин,  апоА1, апоА2, гистидин-обогащенный гликопро-

             теин (гистидин является "уборщиком" гидроксильного

             радикала   /2319к/),   интер- 7a 0-ингибитор   трипси-

             на, 7a 02-HS-гликопротеин).

   -  2"позитивных" 0 значительно (даже  тысячекратно)  повышается.

Для того, чтобы не повышалось онкотическое давление, пропорцио-

нально падает синтез альбуминов ("негативная реакция").

   Наиболее ярким показателем воспалительного процесса являются

орозомукоид, антитрипсин,  СРБ,  концентрация  которых  лишь  в

очень редких  случаях не изменяется при остром воспалении.  При

остром воспалении в 2 и более раз повышается содержание  фибри-

ногена, гаптоглобина, орозомукоида. /2809к/85/

    _Биохимия БОФ .. Большинство БОФ - гликопротеиды.

    5М. БОФ - 12-340 кД, содержание углеводов - 8-45%. /6902/

    5Все БОФ,  за исключением СРБ,  являются сиаловыми кислотами.

 5/6902/ 0  5Включают большое количество отрицательно-заряженных сай-

 5тов. /6902/ 0

   Синтезируются  гепатоцитами.

    _Синтез стимулируется

   - ФНО- 7a 0,

   - ИЛ-1, ИЛ-6, ИЛ-11,

   - гамма-ИФ,

   - трансформирующим фактором роста (ТФР- 7b 0),

   - ciliary  нейротрофическим фактором,

   - лейкемия-ингибирующим фактором,

   - бактериями и вирусами,

   - при аутоиммунных процессах,

   - пр тромбозах,

   - при травмах /6902/

    _Синтез ингибируется

   - инсулиом, okadaic acid,

   - глюкокортикоидами  (снижают уровень ИЛ-1 и повышают актив-

ность печени.

                        Содержание БОФ

─────────────────────┬───────────────┬─────────────────────────

                     │    В норме    │  При остром воспалении

─────────────────────┼───────────────┼─────────────────────────

                     │               │

СРБ    (усл. ед.)    │70 нг/мл,т.е.  │    0,1 г/л

                     │почти нет      │

   - у новорожденных │100 нг/мл с    │

                     │постепенным    │

                     │возрастанием   │

                     │               │

Фибриноген           │2-4 г/л        │

                     │3-4 г/л        │    6-10 г/л

Гаптоглобин (Нр)     │170-300мг/л    │

                     │(70-150 мг%);  │

                     │830-2700мг/л   │

                     │0,1-0,04г%     │

                     │0,6-1,8 г/л    │    3-6 г/л

Преальбумин          │300 7+ 020 мкг/мл  │

Орозомукоид (Оm)     │550-1400 мг/л  │

                     │= мкг/мл       │

                     │0,6-0,9 г/л    │  1,5-3 г/л

Антитромбин-III      │210-300 мг/л   │

С3-компонент         │550-1200 мг/л  │

комплемента          │1,3-1,7 г/л    │  2-3 г/л /2809к/

                     │100 мг%        │

С1q-субкомпонент     │100%           │

комплемента          │               │

Трансферрин          │3030 7+ 0350 мкг/мл│

Церулоплазмин        │260 7+ 030 мкг/мл  │

                     │0,3-0,6 г/л    │  1-2 г/л

альфа-2-макроглобулин│2150 7+ 0150 мкг/мл│

                     │(500-2500 мг/л)│

альфа-1-антитрипсин  │2200 7+ 0200 мкг/мл│

─────────────────────┼───────────────┼─────────────────────────

 4альфа-1-антипротеаз- │2,5-4,0 г/л    │ 5-7 г/л

 4ный ингибитор /???/  │               │                -?

                     4- 12,5%  углеводов.   Угнетает   активность

 4трипсина, химотрипсина,  эластазы, коллагеназы, тромбина, плаз-

 4миногена, ренина,  в некоторой степени - калликреина.  М. 50-55

                            - 13 -

 4кД, поэтому легко покидает русло крови, выходит в интерстиций и

 4взаимодействует с протеиназами ткани.  Отличается высоким поли-

 4морфизмом. Дефицит  сопровождается обструктивными легочными за-

 4болеваниями (эмфиземой  легких)  и  прогрессирующим  ювенильным

 4циррозом. Забоелвание  развивается  у  больных в возрасте 30-40

 4лет. Механизмы не  ясны.  Предположительно  дефицит  ингибитора

 4сопровождается повышенным действием эластазы, коллагеназы нейт-

 4рофилов в месте начинающегося воспаления, что приводит к лизису

 4основного вещества  ткани  легких  и развитию обширных воспали-

 4тельных очагов. /2809к/85/

─────────────────────┴───────────────┴─────────────────────────

    4+ кининоген, прекининоген /?/

    4- ангиотензиноген /?/

    2БОФ делят на 3 группы:

    _А. Транспортные  белки . (преальбумин и металл-содержащие бел-

ки, предотвращающие ПОЛ)

   В процессе воспаления при разрушении эритроцитов может выде-

ляться Hb, стимулирующий процессы ПОЛ.

   -  2Преальбумин 0 транспортирует витамины и гормоны.

   -  2Гаптоглобин 0 /Hp;  М. 40кД/

     -- связывает свободный гемоглобин. Комплексы захватываются

        клетками РЭС /205/,  не фиксируются  клубочками  почек,

        что предотвращает гемосидероз почек.  /2809к/85/ Период

        полувыведения из крови  комплекса  Нв-Нр  10-20  минут.

        Комплексы распадаются в гепатоцитах печени. /2809к/85/

     -- Участие в процессах детоксикации.  Нр  комплексуется  с

        различными белковыми и небелковыми веществами, появляю-

        щимися при распаде клеток поврежденной ткани,  в т.ч. с

        протеазами (например,  катепсином В, D, некоторыми ком-

        понентами АПК). /2809к/85/

     -- Иммунореактивный белок.

     -- Обладает иммунопероксидазной активностью.

    5Синтезируется печенью и в тканях, входящих в состав рэс: се-

 5лезенке,  ЛУ,  тимусе.

    5Разделяют 3 типа белка 0:

   - 5- Hp 1-1 0 (М. 85 кД) 5,

   --  5Hp 1-2 0 (М. ??????????????????) 5,

   --  5Hp 2-2 0 (М. 160 кД)

 5(у человека 0  5по одному из них).  /205/ 0  5Недостаточность Hp встре-

 5чается редко.  /420/ 0 Молекулярная структура напоминает строение

иммуноглобулинов. /2809к/85/

   -- Содержание повышается в 3-5 раз при инфекционных  процес-

сах /1695/ и развитии опухолевых процессов. Выявлена корреляция

между концентрациями гаптоглобина и  орозомукоида  и  диаметром

опухоли. /269/

   -- Уровень снижается при гемолитической анемии, не определя-

ется после  переливания несовместимой крови.  /284/ При его не-

достатке может развиться пароксизмальная ночная  или  холодовая

гемоглобинурия.

   -  2Гемопексин 0 связывает свободный гем.

   -  2Трансферрины 0 (в т.ч. лактоферрин)

     -- транспортируют железо к клеткам эритрона; ("негативный"

        белок);

     -- проявляют  антимикробные  свойства (связывают железо из

        питательной среды).

   -  2СОД 0 (супероксиддисмутаза) - антиоксидант,

   -  2Церулоплазмин 0 (ЦПЗ). М. 124-134 кД /2809к/85/.

     -- транспортирует  медь  в  печень (экскреция с желчью для

        удаления из организма) и  к  медьсодержащим  ферментам.

        /2809к/85/

     -- стимулирует эритропоэз

        (является колониестимулирующим фактором);

         5Связывает медь и т.о. осуществляет его детоксикацию.

     -- является акцептором супероксидных радикалов (ЦПЗ  назы-

        вают "внеклеточной СОД"),  т.е.  осуществляет антиради-

        кальную защиту. /6902/

    _Б. Белки системы комплемента . - С3, С4, С1q, комплекс С56.

 5С1q /?/  -  стимулирует первичный  иммунный ответ,

 5С1-In

 5С2,С4,С4вр 0,

 5С3,С5,ф.В - в расщепленном виде являются опсонинами (С3в) и хе-

         5мотаксическими агентами (С5а).

 5С9  /7528/

    _В. Белки со специфическими функциями

   - Факторы  ССК ( 2фибриноген 0 /предполагая активацию свертываю-

     щего процесса/, ф. Виллебранта);

      2Фибриноген 0 -  белок,  переходящий под действием тромбина в

                   фибрин. М. 340 кД. Углеводный компонент сос-

                   тавляет 4-5% массы белка. Свойства белка:

     -- участие в  _свертывании крови .; продукты деградации фибри-

        ногена  и  фибрина  обладают противосвертывающей актив-

                            - 14 -

        ностью; что способствует восстановлению кровотока в зо-

        не воспаления;

     -- в  интерстициальной ткани фибриноген создает основу для

        фибробластов и гистиоцитов (в фибриновый матрикс мигри-

        руют фибробласты) и способствует  _заживлению ткани .; пос-

        ле синтеза коллагена в  пораженном  участке  образуются

        новые капилляры и восстанавливается нормальное строение

        ткани;

        --- При недостаточности фибрин-стабилизирующего фактора

            (фактора XIII) раны долго (месяц)  не  заживают,  а

            особи  женского  пола остаются бесплодными (кстати,

            гемофилии А нет у женщин).

        --- Тромбопластина много в яйцеклетке.

     -- повышенная концентрация фибриногена и фибрина в повреж-

        денной  ткани усиливает миграцию в нее гранулоцитов и в

        то же время они принимают на себя  _основной удар . со сто-

        роны  _протеиназ . лейкоцитов и повреждающих клеток ткани.

        --- Продукты расщепления фибриногена и фибрина являются

            хемотаксическими агентами,  приводящими к скоплению

            в месте повреждения лейкоцитов. Активированные лей-

            коциты  начинают  продуцировать  ряд физиологически

            активных веществ (интерлейкины, фактор некроза опу-

            холей,  факторы роста,  интерфероны),  роль которых

            сначала заключается в стимуляции  синтеза  соедини-

            тельно-тканных  элементов  и пролиферации (деления)

            клеток, а затем после изменения соотношения регуля-

            торов  начинается  вторая фаза регенерации - выброс

            коллагеназы для растворения  лишней  соединительной

            ткани  и  запуск  механизма апоптоза - самоубийства

            клеток.  В литературе описана версия, что у лиц при

            сниженной  апоптозной  способности  клеток в данный

            период может инициироваться опухолевый процесс.

   -  2Орозомукоид 0 (его содержание повышается при  онкологических

заболеваниях). М. 44 кД.  440% массы составляет углеводный компо-

 4нент. 0 Ингибирует катепсин С. Функция неизвестна. /2809к/85/

    2Ингибиторы ферментов 0 (лизосомальных ...):

   -  7a 41 0-антитрипсин

   -  7a 41 0-антихимотрипсин

    4- 0  7a 42 0-антиплазмин

   - кофактор II гепарина

   - ингибитор активатора плазминогена

   - антитромбин-III

   -  7a 62 2-Макроглобулин

   М. 725 кД; состоит из двух идентичных /?/ субъединиц (по др.

данным - 10 субъединиц). Содержание - 2-4 г/л. /6224/ Ингибиру-

ет плазмин,  тромбин,  калликреин,  ферменты классического пути

активации комплемента; синтезируется вне печени.  7a 02-макроглобу-

лин связывает все чужеродные лектины.Рецептор-подобные молекулы

к   7a 02-МГ являются рецепторными молекулами для экзотоксина Рseu-

domonas. /7546/93/

    2Альфа-1-антитрипсин 0 защищает ткани легких от  протеолитичес-

кого разрушения  эластазой  нейтрофилов.  Синтезируется преиму-

щественно клетками паренхимы печени. Врожденный дефицит ингиби-

тора (норма 2,4 г/л) является причиной развития эмфиземы легких

во взрослом возрасте. Недостаточность связывается с возникнове-

нием бронхиальной  астмы.  Синтез  патологического Z-мутанта (в

отличие от нормального М-типа) сопровождается болезнями  печени

- от холестаза у новорожденных до цирроза печени и гепатоцеллю-

лярной карциномы у взрослых. /2372к-х/

    2Другие белки 0: /7237/94/

   - СРБ (см. ниже)

   - амилоид Р (см. ниже)

   - ЛПС-связывающий белок

    5- a1-кислый гликопротеин

    5- heme oxygenase

    5- манноза-связывающий белок

    5- лейкоцитарный белок 1

   -  2Апо(а) 0 обладают антиоксидантной активностью.  Концентрация

при  воспалении повышается с 2 до 280 мг%.  Апо(а) удаляется из

кровотока путем связывания с ГЗГ (=глюкозаминогликанами)  внек-

леточного  матрикса  стенки  артерий  и последующего поглощения

макрофагами. Связываются с ЭК, лимфоцитами, фибрином, продукта-

ми деградации фибрина (пдф),  фибронектином, эластином, ГЗН-ми.

Апо(а) удаляется из кровотока путем связывания с ГЗГ внеклеточ-

ного матрикса стенки артерий и последующего поглощения макрофа-

гами. /6902/

    2С-РЕАКТИВНЫЙ БЕЛОК (СРБ) 0 /7483,2854,7965/

    5Открыт в 1930г. Маркер острого воспалительного процесса.

    _Биохимия

   СРБ - лектин антигалактанового типа с М. 118-144кД.

    5Семейство белков - пентраксинов. Не гликопротеид.

   Состоит из 5 (6-?) идентичных (циклических-?) субъединиц  (с

М. по 21,5кД /23кД-?/),  связанных нековалентно между собой. На

                            - 15 -

каждой субъединице по одному фосфохолин-связывающему  центру  и

по одному ФХ-независимому центру. /7489/

   Связывает

   - полисахарид-С пневмококка,

   - фосфатидилхолин (в  капсуле  пневмококка-???)  через  ионы

     Са 52+ 0.

   - Полимерная форма - п-СРБ.  4Пентамерный (нативный) 0  4СРБ обла-

 4дает противовоспалительным действием. /1691к/ 0

   - мономерная форма - м-СРБ.   4Мономерный СРБ обладает провос-

 4палительным действием, 0

   - тафтсиноподобные пептиды - А,Б,В (по 4 аминокислотных  ос-

     татка).

    5Время полужизни - 4 часа. /7490/ 0

    _ 5Синтез

    5Синтезируется лимфоцитами (моноциты не продуцируют), гепато-

 5цитами в ответ на эндогенные пирогены. /7482,7485/

    5Индуцируется /7965/

    5- ИЛ-1,

    5- травмой, 0  5- облучением,

    5- микроорганизмами.

    5Синтез регулируется интерлейкинами и половыми гормонами.

   Высокая концентрация  СРБ  наблюдается при кортикостероидной

терапии. /2809к/85/

    _Свойства

    1. Служит  опсонином  (через  комплемент тоже) и производит

детоксикацию организма./7491/ Повышает функциональную активность

фагоцитов.

    5Рецептор для  С-РБ имеется в основном на клетках с Fc-рецеп-

 5торами (100% моноцитов, нейтрофилах /6154/, 2% Т-лимфоцитов, на

 5В-лимфоцитах нет). /7487/

   Осуществляет клиренс

   - микроорганизмов,

   - "старых", поврежденных и некротических клеток и их продук-

тов,

   - связывается с ДНК, нуклеотидами,

   - липидами, ЛПНП, ЛПОНП,

   - ПС (остатками галактозы) /7488/. /7965/87/,7580/

   - фибронектином /6149/

   - лецитином,

   - сфингомиелином некротизированных тканей

   - ПС-С стрептококков,

   - холинфосфатидом,

   - лектином

   + протамины, гистоны,

   + основные белки миелина,

   + катионные белки  лейкоцитов

   ── 76 0 активация комплемента с С5- ?. /297/

    2. Комплекс   С-РБ   с   лигандом   запускает  КПК  и  АПК.

/7584,3169,2854;7965/ Провоспалительное действие. /1691к/

  СРБ приводит  к фиксации на комплексах комплемента (С1q,  С2,

С4, С3,), в результате чего общая гемолитическая активность сы-

воротки  снижается  на  80%,  а  компонентов С3-С9 - на 45-66%.

/1584/

   ── 76 0 С3-зависимый фагоцитоз комплексов. /297/

   Мономерный СРБ оказывает провоспалительное действие,

   нативный пентамерный   -   противовоспалительное   действие.

/2256к/96/

   3. СРБ in vitro в концентрациях 50-250 мкг/мл обладает  выра-

женным  митогенным действием в отношении лимфоцитов.  Митогенные

свойства теряются при блокаде фосфорилхолиновых сайтов  связыва-

ния СРБ. /2274к/94/ CРБ усиливает спонтанную пролиферацию лимфо-

цитов in vivo. /2808к/96/

   4. Запускает реакцию преципитации и агглютинации; (артефакты

в реакция агглютинации с микробами)

   5 4. Регулирует активность лимфоцитов,  моноцитов,  гранулоци-

 4тов, тромбоцитов и эритроцитов (всех форменных  элементов  кро-

 4ви)./6149/ 0 Стимулирует   активность  ЕКК  (тормозит  опухолевый

рост); стимулирует противоопухолевую активность макрофагов. /7965/

   6. СРБ является слабым хематтрактантом для нейтрофилов.  Эти

свойства могут быть связаны с тафтсиноподобными пептидами,  об-

разующимися при протеолизе СРБ под действием лизосомальных фер-

ментов. /2365к/ Поглощенныые  нейтрофилами СРБ  слудит  хемоат-

трактантом для  нейтрофилов  и  обеспечивает  их  привлечение в

очаг.  Сущность механизма проникновения нейтрофилов в  воспали-

тельный  очаг  состоит  во  _взаимодействии СРБ с фибронектином и

 _ламинином . соединительной ткани, его накопление в очаге воспале-

ния  и распаде на мономеры под действием кислотных условий оча-

га. /2365к/

   7 4. Ингибирует агрегацию тромбоцитов.

   Т.о., С-РБ  выполняет  функцию АТ на ранних стадиях воспали-

тельной реакции (эволюционный предшественник антител).

Сходство с антителами: 1. опсонин

                       2. активация комплемента

                       3. РА и РП

                       4. Хемотаксин

    _Содержание

                            - 16 -

   - У новорожденных - 0,1 мг/л (15-6000 мкг/л сыворотки у здо-

ровых новорожденных).  Корреляция между концентрацией СРБ в сы-

воротке матери и сыворотки  новорожденного  отсутствовала,  что

указывает на эндогенное происхождение СРБ новорожденного. /2362к/

    4Увеличение концентрации  СРБ у новорожденных до 10 мг/л сви-

 4детельствует о наличии инфекционной патологии (пневмонии,  сеп-

 4сиса, бактериальной кишечной инфекции). /7486/

   - Концентрация СРБ в сыворотке здоровых детей в возрасте  не

изменялась. /2362к/85/ У детей в возрасте 1 месяца - 150 мкг/л,

у детей 8-12 лет - 170.

   - У взрослых - 470 (мкг/л). (др. - 3 мг/л)

    1В нормальной сыворотке этот белок не определяется  0 (содержа-

ние 10 мг/л).  Во время воспаления и при деструкции тканей кон-

центрация увеличивается в 20 раз и более (до 200 мг/л =  200000

мкг/л и более); содержание СРБ отражает интенсивность патологи-

ческих процессов. Повышается с возрастом.

   При сепсисе концентрация СРБ превышает 10 мг/л. /2362к/85/

    4Предполагается, что  роль СРБ заключается не столько в выве-

 4дении лиганда, сколько в изменении его распределения в организ-

 4ме. /7490/

    5При гиалиновой мембранной болезни и при желтухе концентрация

 5СРБ не возрастает. /2362к/

    _Определение.

   Метод кольцепреципитации.

    2АМИЛОИД Р 0 - БОФ, родственный СРБ-ку. /1691к/

    4Структура. СРБ состоит из одного 5-членного кольца,  сыворо-

 4точный амилоид Р - из 2-х состыкованных колец.  Молекулы возни-

 4кают в результате дупликации общего гена. Продуцируются гепато-

 4цитами под действием ИЛ-1, ИЛ-6. 0/1691к/

    _Свойства. .

   - Обладает  устойчивым противовоспалительным действием.

   - При связывнии с хроматином и гистонами активирует  компле-

мент по классическому пути.

   - Участвует в формировании фибриллярного компонента  бляшек,

   - ингибирует   эластазу  (препятствует  разборке  амилоида).

/1691к/

   - опсонизатор элиминации модифицированного ЛПВП из крови.

   Уровень в  норме - 40-70 мкг/мл сыворотки,  при ревматоидном

артрите, коллагенозах,  амилоидозах уровень увеличивается в 2-4

раза. /1691к/

    2VI. ИНТЕРФЕРОНЫ 0 /6195/

    5(от лат.  inter - между, ferens - несущий; от явления, когда

 5организм или клетка,  инфицированные одним вирусом, становились

 5нечувствительными к заражению другим вирусом)

   ИФ открыты в 1957г. Айзексом и Линдеманном.

   Интерфероны (ИФ) - секреторные видоспецифичные белки, синте-

зируемые клетками и обладающие противовирусными и противоопухо-

левыми свойствами. ИФ - гетерогенные белки (М.20-40кД;  5альфа- и

 5бета-ИФ включает 166 аминокислот,  гамма - 146) гликопротеидной

 5природы. Выделяются в виде предшественников. /7954/92/

    _Выделяют 3 вида ИФ:

   альфа - из культуры лейкоцитов   │ 1-ый тип

         -  5синтезируются лейкоцитами и кератиноцитами,

   бета  - из культуры фибробластов │

          5-  0синтезируются  5фибробластами,

            5кератиноцитами,

            5эпителиальными лейкоцитами /1666к/94/

   гамма - из  культуры активированных митогеном     │ 2-ой тип

           или антигеном Т-лимфоцитов (иммунный ИФ).

          4- синтезируется активированными Т-лимфоцитами и ЕКК.

            4/2461к/

            5Гамма-ИФ вырабатывается в Т-лимфоцитах-хелперах  под

            5действитем специфического антигена, растительных ми-

            5тогенов, форболовых эфиров. /7954/92/

   Концентрация в крови - 2 МЕ/мл

   1 МЕ  (международная  единица)  - количество ИФ,  защищающее

культуру клеток от 1 ЦПД 450 0 вируса.

   У грудных детей концентрация ИФ несколько выше. /7481/

    _Синтез .

   осуществляется всеми  клетками  организма (в большей степени

клетками рэс) и  1стимулируется 0

   - вирусами, бактериями,  эндотоксинами,

   - фрагментами собственной ДНК,  (дибазолом), двунитевой РНК,

   - клетками РЭС 1,

   - в  красном  костном  мозге  колониестимулирующим  фактором

     /КСФ/ /7954.../ Продукция ИФ инфицированными клетками  мо-

     жет  предохранять прилегающие клетки от последующего инфи-

     цирования.

    4Отмечено эволюционное  родство  альфа-2-интерферона  и  аль-

 4фа-1-тимозина, которые  экскретируются  клетками  ИС,  а  также

 4синаптическими мембранами клеток головного мозга. /1652к/

    4Бета-ИФ предположительно  может  являться природным антиго-

 4нистом КСФФ, тормозя сверхпролиферацию гемопоэтических клеток и

                            - 17 -

 4ускоряя их созревание.  /7954/92/

    _Рецепторы

    4Альфа и бета-ИФ имеют общий рецептор. /1666к/94/

    4Рецепторы /R/ для ИФ (гликопротеины) + ИФ  0── 76 4 активация фосфоли-

 4пазы А2   0── 76 4 метаболизм арахидоновой килоты под действием эпок-

 4сигеназы в эйкозаоиды, которые стимулируют образование индукто-

 4ра транскрипции.  /7954/92/

    _ 2Функции

   (В основном антимикробное и иммуномодулирующее действие).

   1.  _Стимулируют  ИС .  (повышают продуцию АТ /в избытке ИФ - по-

давляют/, В-лимфоциты).

   - Стимулирует АПК (антигенпрезентирующие клетки) и их микро-

бицидную активность.  Под влиянием  бета-ИФ  моноциты/макрофаги

активно синтезируют ФНО_альфа,  который усиливает цитотоксичес-

кие функции у моноцитов/макрофагов  и  киллерную  активность  у

ЕКК. /2348к/

   - Стимулирует созревание В-лимфоцитов в плазматические клет-

ки /7954/92/. Усиление активации АТ-образования. /2292к/

   - Подавляет ГНТ и ГЗТ,  но в момент индукции  -  стимулируют

аллергию /2126к,2157к/.

   - Усиление адгезии лимфоцитов на ЭК. /2272к/

   2. Ингибитор роста и пролиферации клеток /2230к/96/

   --  _ 1Антипролиферативное  действие .  ИФ на клеточный рост 0 (нор-

мальных и злокачественных клеток /2126к/) зависит,  по  меньшей

мере,  от  синтеза  индоламино-2,3-двуоксигеназы,  расщепляющей

триптофан,  необходимый для роста клеток эукариот, в т.ч. внут-

риклеточных паразитов - простейших. /7954/92/

   - Препятствует росту  1простейших и паразитов 0.

   -  1Подавление репродукции  _вирусов . 0 вследствии нарушения иници-

ации  синтеза  вирусных белков (иРНК не прикрепляется к рибосо-

ме). При этом функции клетки сохраняются.

    4(Торможение репликации вирусов в клетке связано с  индукцией

 4ИФ-ом таких ферментов,  как олигонуклеотидсинтетаза /ОС/ и про-

 4теинкиназа.  ОС в присутствии 2-нитевой РНК синтезирует из  АТФ

 42'5'-адениловые олигомеры,  активирующие РНКазу L,  действующую

 4на РНК вирусов и самой клетки. Протеинкиназа фосфорилирует аль-

 4фа-субъединицу  инициирующего  фактора,  препятствуя трансляции

 4вирусных белков. /7954/92/)

   -  _Активирует  1ЕКК . 0 (естественные клетки-киллеры)  /7954/92/;

   -  _Антибактериальное .  действие (преимущественно на Г+  микро-

флору): нарушает  размножение микробов в течение 10 минут инку-

бации с бактериальной структурой. /2126к/

   -  4(Подавляет  _инвазию клеток .,  вызванную  Eimeria  tenella  и

 4S.typhimurium,  подавляет  репродукцию  малярийного  плазмодия,

 4токсоплазм,  риккетсий, лейшманий, трипаносом, листерий, хлами-

 4дий, микобактерий и др. Повышает неспецифическую резистентность

 4к инфекциям,  вызванным Kl.pneumoniae,  L.monocytogenes  и  др.

 4/7073/) 0

   3. Активирует  фагоциты  /7680/89/.  Повышает цитотоксической

активности  _ 1макрофагов . 0. Усиливает синтез Fc-рецептора /7954/92/.

   - Гамма-ИФ усиливает продукцию ФНО-альфа. /2461к/

   - Активирует   _фосфолипазу  А2 .  с  образованием  эйкозаноидов

/6195/, стимулирует продукцию нитроксидных радикалов. /2461к/

   - Усиливает синтез и экспрессию HLA антигенов I (альфа,  бе-

та-ИФ) и II (гамма-ИФ) классов /7954/92/;

   - Усиление мобилизационных реакций нейтрофилов. /2292к/

   4. Ослабление продукции ГМ-КСФ.

   5. Пирогенность (прямое действие на гипоталамус). /2292к/

   6. Синергетические  эффекты  с  ФНО  и  другими  цитокинами.

/2292к/

   7. Усиление экспрессии адгезивных молекул на ЭК  и  лейкоци-

тах. /2292к/

   8. Усиление  ЛПС-индуцированной  секреции  макрофагами  ФНО,

ИЛ-1, ИЛ-6;   усиление   биоцидности  макрофагов  и  экспрессии

ФНО-рецепторов. /2292к/

    _Получение .

   ИФ видоспецифичны  (ИФ  одного  вида  животных  не подавляет

размножение вирусов у другого вида животных),  но не вирусоспе-

цифичны.

   3 метода получения ИФ:

    4(Из крови  не получают,  так как для получения одного грамма

 4ИФ из крови необходимо обработать 100 тысяч литров крови.)

   1. Химический синтез активной части молекулы;

   2. Включением гена ИФ в бактериальные клетки (Е.с.); выделя-

ют из экстракта осадка клеток Е.с.  аффинной хроматографией (на

колонке с МАТ); = интерферон А. Схема получения: накопление ре-

комбинантного штамма (1-2 суток),  отделение биомассы, разруше-

ние структур, ресуспендирование в буфере, ультрафильтрация, аф-

финная  хроматография супернатанта на колонке с моноклональными

антителами,  промывка колонки,  срыв ИФ 2М  NaCl-?,  лиофильная

сушка и стандартизация.

   3. Выделение из культуры лейкоцитов,  фибробластов и  других

клеток:

                            - 18 -

   Схема получения:  культуру клеток заражают одним из  непато-

генных для человека виросов (вирусы Сендай,  болезни Ньюкастля,

везикулярного стоматита), через сутки центрифугируют, надосадок

очищают аффинной хроматографией, ультрафильтрация (для удаления

вирусов-?), лиофилизация, стандартизация.

   Длительное введение рекомбинантных ИФ стимулирует образова-

ние у 30%  больных АТ к ИФ. Природные ИФ практически не иммуно-

генны. /7492/

   Другие противовирусные ингибиторы - липопротеиды, мукопроте-

ин (альфа), подавляющие активность вирусов полиомиелита, клеще-

вого энцефалита,  миксовирусов,  подавляя адсорбцию  вирусов  к

клетке.

    2VII. ЛИЗОЦИМ

   Открыт Флемингом в 1922г.

    _Биохимия

   Это низкомолекулярный (М.15 кД) щелочной фермент -  1мурамида-

 1за 0 (бета-глюкозаминидаза),  гидролизирующий связь N-ацетилмура-

мовой  кислоты и N-ацетилглюкозамина,  содержащиеся в клеточной

стенке некоторых микроорганизмов (растворяет мукополисахариды).

/6528/89/  4130 аминокислотных остатков.

    _Синтез

   Синтезируется фагоцитирующими клетками (моноцитами, макрофа-

гами, полиморфоядерными лейкоцитами), накапливаясь в гранулах и

лизосомах, затем поступает в плазму,  синовиальные  оболочки  и

выделяется преимущественно со слюной, слезной жидкостью и моло-

ком. Высвобождение лизоцима из клеток кальций (Са 52+ 0)-зависимо.

    _Функции

   - Лизирует многие сапрофиты, например, Micrococcus lysodeic-

ticus, и некоторые патогенные бактерии, поврежденные антителами

и/или комплементом. Значение лизоцима как микробицидного факто-

ра невелико в связи с весьма ограниченным его антибактериальным

спектром,  который включает в  основном  сапрофитные  бактерии.

/350/84/ Антимикробное действие лизоцима распространяется глав-

ным образом на  _Г+ кокки ..  /7073/-?  4Кроме лизоцима микробицидную

 4активность могут проявлять и другие гидролазы: аргиназа, глико-

 4зидаза. /350/84/ 0 Лизоцим проникает до пептидогликанового слоя и

разрушает цитоскелетные элементы.

    5- Лизоцим у крупного рогатого скота в преджелудках и у  тра-

 5воядных обезьян  выполняет сходные функции в ферментации расти-

 5тельной пищи в ЖКТ.  /7959/87/

    5- Фрагмент лизоцима Thr-Leu-Lys-Arg обладает иммуномодулиру-

 5ющими свойствами (предположительно).  /7960/87/ Лизоцим ингиби-

 5рует лимфобластогенез и пролиферацию клеток  в  СКЛ.  /7961/86/

Лизоцим способствует репаративным процессам.  /7073/ Активирует

фагоцитоз и хемотаксис лейкоцитов. /7073/

    _Содержание

   Лизоцим содержится в слезах,  крови,  бронхиальном  секрете,

молоке, курином белке и в икре разных рыб. Особенно много лизо-

цима в  слюне животных (зализывание ран животными).  Этим может

объясняться относительно легкая заживляемость ран и  царапин  в

ротовой полости, например, после удаления зуба). /293/

   - В крови - 2 мг/л (порядка 1 мг/мл). При беременности у че-

ловека индуцируются большие количества лизоцима,  который обна-

руживается в плаценте,  матке, амниотической жидкости, семенной

плазме, цервикальной слизи. /7982/85/ В женском молоке лизоцима

в 100 тысяч раз больше, чем в коровьем.

   - В слезной жидкости в 150 раз больше (устойчивость роговицы

особенно к  кокковой  микрофлоре;  в отношении некоторых кокков

слеза действует в разведении в 10 млн раз /293/).

   - Уровень лизоцима наиболее высок в сыворотке  новорожденно-

го;  держится на высоком уровне до 3 лет, затем с возрастом со-

держание падает.

   - В  куриных  яйцах  (лизоцим  белка служит надежной защитой

против весьма опасной для него стафилококковой инфекции). /293/

Лизоцим полностью обусловливает бактерицидные  свойства  свежих

яиц.

    _Определение активности .  имеет  определенное  диагностическое

значение при гематологических (лейкоз,  гранулематоз), нефроло-

гических, инфекционнных и  эндокринных  /диабет/  заболеваниях.

/6528/ В  качестве стандарта для определения количества (титра)

лизоцима в испытуемом материале служит культура микрококка (ли-

зодеинтикус). /293/

    _Антилизоцимная активность  микробов . считается фактором пато-

генности.  Высокая степень антилизоцимной  активности  показана

для менингококков, особенно серогрупп А, В и С. /2381к/

    _Лизоцимная активность микроорганизмов

   Известно, что лизоцимная активность присуща многим бактериям

(Г- и Г+). Функция - регуляция экологии бактерий. /6339/

   Наиболеее выраженной лизоцимной активностью обладает

   - штамм синегнойной палочки (40%).

   - Патогенная  кишечная  палочка  выделяет  только от больных

(активность в 33%).

   - У  стафилококков внешней среды лизоцим обнаружен в 23%,  а

от больных - 31%.

                            - 19 -

   - Некоторые сальмонеллы.

    2VIII. КАТИОННЫЕ БЕЛКИ

   Катионные белки (фагоцитин,  лейкин и др.) содержатся в азу-

рофильных и специфических гранулах нейтрофилов и высвобождаются

как в просвет лизосом, так и внеклеточно. При активации нейтро-

филов содержание белков падает.  При  незавершенном  фагоцитозе

высвобождение затормаживается. /2723к/

    _Биохимия

    4Насчитывается 7 белков,  обусловливающих бактерицидное дейс-

 4твие. К ним относятся альфа-,бета-,L-лизины (лизоцим, лактофер-

 4рин), гистоны, протамины, щелочные полипептиды.

    4Катионные белки на 50%  состоят из гидрофобных аминокислот и

 4в избытке содержат аргинин и лизин. Некоторые из катионных бел-

 4ков  по своему противомикробному действию напоминают полимиксин

 4В и инактивируют Г- бактерии. /7664/84/

    4М. бета-лизинов - 6кД.

    _ 5Содержатся  .в  лизосомах лейкоцитов (ткани почек,  селезенке,

 5легких, головного мозга,  надпочечников) и тромбоцитов./272-39/

 5Их нет в лизосомах других клеток.

    _Свойства

   - вызывают повышение проницаемости клеточной стенки бактерий

в присутствии кислорода /анаэробы устойчивы к катионным белкам/

(положительно заряженные белки сорбируются на  отрицательно-за-

ряженных поверхностях); тем самым облегчается проникновение ли-

зосомальных ферментов в цитоплазму поглощаемых частиц.

    1В настоящее время особо важное значение придается дефензинам

 1- богатым   аргинином  белкам,  которые  обладают  способностью

 1встраиваться в липидный слой клетки,  нарушать ее проницаемость

 1и убивать  широкий  спектр  бактерий,  грибов  и  даже вирусов.

 1/2291к/ 0 - ПОВТОР

   - или вызывают агрегацию лигандов (инактивируя т.о. микроор-

ганизмы)./272/

   - Щелочные полипептиды эозинофилов участвуют в лизисе  пара-

зитов. /7073/

   - Лактоферрин связывает железо и оказывает бактериостатичес-

кое действие (цитохромы).

   Инактивируют Г- микроорганизмы ( и некоторые  Г+,  например,

бациллы), отчасти  кандиды.  /272-37/ Катионные белки высокоак-

тивны против кандид и Г+  бактерий,  в  то  время  как  Е.с.  и

Salm.typhimuium более устойчивы к их действию. /350/84/

   Катионные белки альвеолярных макрофагов высокоактивны против

кандид и Г+ бактерий - Г+ бацилл и др.  (Г- кишечная палочка  и

сальмонеллы устойчивы к их действию).

    _Синтез

   Основными продуцентами бета-лизинов служат тромбоциты,  сте-

пень разрушения которых при  свертывании  крови  коррелирует  с

возрастанием уровня бета-лизинов.

       2IX. NO 5- 0 (окисел азота)

   Высвобождение оксида азота (NO) из лейкоцитов,  эндотелиаль-

ных, тучных клеток, нервных окончаний оказывает мощное

   - микробицидное,

   - цитоцидное,

   - противовоспалительное,

   - противоишемическое,

   - противотромботическое,

   - цитопротективное действие. /2734к/

   Слюной поддерживается нормальный уровень генерации NO в тка-

нях полости рта. /2734к/

    5Синтез происходит  только в присутствии L-аргинина,  который

 5является   исходным   продуктом,   подвергающимся   воздействию

 5NO--cинтетазы. NO- является промежуточным продуктом превращения

 5L-аргинина,  окончательный же продукт - NO 42 5, по уровню которого

 5в моче или культуральной жидкости можно судить об интенсивности

 5синтеза. /2294к/

   Синтез индуцируется ФНО, ИЛ-1 и др. /2372к-х/

   Альфа-ФНО  активирует  NO-синтетазу,  вызывающей образование

NO-реактивных  метаболитов.  ИЛ-10   ингибирует   NO-синтетазу.

/2294к/95/ Пути  генерации окиси азота и супероксиданиона в фа-

гоцитах конкурентны: продукция окиси азота (опухольинфильтриру-

ющими макрофагами)  сопровождается  уменьшением продукции супе-

роксиданиона (в перитонеальных макрофагах наоборот). /2445к/98/

   Высокая активность нитрооксид(NO)cинтетазы обнаружена в ней-

ронах. Обильную  NO-ергическую  иннервацию  получают  артериолы

подслизистой основы и слизистой оболочки пищевода.

   NO-синтетаза, как фермент энергетического обмена, появляется

у анаэробных организмов в докислородную эру жизни. Затем форми-

руется холинергическая передача. У аэробов NO-ергическая иннер-

вация выполняет  функцию или медиатора,  или модулятора нервных

импульсов в  нейронах,  исторически  более  старых   генераций.

/2306к/98/

                            - 20 -

   NO, образуемый из L-аргинина специфической синтетазой в ней-

ронах и ЭК,  участвует в нейротрансмиссии и вазодилатации, пре-

пятстсвует адгезии и агрегации тромбоцитов. Гиперпродукция NO в

самых различных тканях в условиях септического  шока,  обуслов-

ленного Г-  флорой,  сопровождается  усиленным лизисом бактерий

активированными макрофагами,  падением артериального давления и

угнетением функциональной  активности  миокарда  - характерными

проявлениями гиподинамической стадии септического шока./2372к-х/

   NO также является одним из медиаторов в развитии респиратор-

ного дистресс-синдрома взрослых.  В результате реакции между NO

и супероксидным  анион-радикалом образуется пероксинитрит,  вы-

полняющий роль цитокина при различных патологических  процессах

и болезнях.   _Ингибиторы NO . оказались эффективными в лечении эн-

дотоксемии и  предупреждении при этом расстройств гемодинамики,

но усиливают повреждение печени.  С другой стороны,  NO образует

комплекс  с  гемовым железом цитохрома Р-45- и инактивирует этот

ключевой фермент монооксигеназной системы печени,  объясняя рез-

кое  уменьшение содержания цитохрома Р-450 в печени крыс в усло-

виях экспериментальной эндотоксемии. /2372к-х/

       2X. ЛЕКТИНЫ

   Это белки,  способные  связываться с определенными моносаха-

ридными звеньями в полисахаридах и гликопротеидах (т.е. это уг-

леводсвязывающие белки).

    4[Связывание обратимое и необратимое.]

    4Термин введен  Бойдом  (W.C.Вoyd)  в 1954 году.  В последнее

 4время предполагается термин  аффинитины.  Развивается  наука  -

 4лектинология.

    _Биохимия

   По природе лектины являются гликопротеинами;  в качестве не-

белковой компоненты содержат углеводы (3-80%,  в среднем 3-10%)

 4и ионы металлов (ионы кальция, марганца, в небольшом количестве

 4ионы цинка,  магния и пр.). [Исключение - конконавалин А и лек-

 4тин гороха  не содержат углеводов.] Удаление металлов сопровож-

 4дается потерей биологической активности,  после удаления  угле-

 4водной компоненты активность сохраняется.

   Лектины -  многовалентные лиганды с 2-4 центрами связывания.

── 76 0 Склеивание клеток.

    _Функции

   1. Связывают  и  удаляют  (эндоцитоз) из кровотока следующие

частицы (вирусы,  токсины микробов, иммунные комплексы, образо-

ванные  иммуноглобулинами  А и G,  факторы роста,  трансферрин,

транскобаламин, ЛПНП;

    1Рецепторы лектинового типа 0 имеются на фагоцитах клеток пече-

ни и селезенки. Маннозо-6-фосфатные рецепторы принимают участие

в сортировке лизосомальных ферментов.

   2.  1Рецепторы  к лектинам 0 имеются на Т-лимфоцитах (экспрессия

увеличивается под действием гормонов тимуса  и  нейраминидазы),

стимулируют   хоминг  предшественников  Т-лимфоцитов  в  тимус.

/7507/

   3. Лектины и лектиновые рецепторы ИКК участвуют в формирова-

нии аллергической реактивности. Показано, что образование комп-

лекса  лектин-лектиновые  рецепторы  на  поверхностной мембране

лимфоцитов может блокировать АГ-связывающие  рецепторы  послед-

них.

   4. Cпособны вызвать агглютинацию клеток (агглютинация эритро-

цитов рицином вызывает мгновенную смерть) или их  митоген-

ую стимуляцию (что используется в серологиии)

     Например, 1  0Соn A - конконавалин А (из семян Сanavalin ensi-

                       fermis) - митоген для Т-супрессоров,

               лектин  лаконоса - митоген для Т- и В-лимфоцитов

                       (стимулирует ответ В-лимфоцитов на тимус-

                       зависимый антиген);

               джекалин выделен из экстракта хлебного дерева;

                       - митоген для Т-хелперов (CD4+);активатор

                       В-лимфоцитов;  избирательно связывает

                       только Ig A (используется  для аффинной

                       хроматографии);  /7493/90/

                фитогемагглютинин (ФГА)-митоген для Т-супрессоров;

                       получают из экстракта Phaseolus (vulgaris

                       или communis);

                лектин Helix pomatia связывается с АГ А эритро-

                       цитов, и преимущественно с Т-лимфоцитами

                клещевины (рицин) - агглютинирует эритроциты,

   5 4. Некторые лектины активируют КПК в сыворотке человека.

   6. Обеспечение специфических межмолекулярных  и  межклеточных

взаимодействий (особенно у растений);

   7. Транспорт и накопление углеводов 1.

   8 4. Лектин гороха (связывает БОФ - альфа-1-антитрипсин,  церу-

 4лоплазмин, гаптоглобин, гемопексин), иммуноглобулины М,G,А;

   Все чужеродные лектины связывает альфа-2-макроглобулин.

    6Примеры 0.

    4В основном  это растительные белки,  тем не менее лектинопо-

                            - 21 -

 4добные белки обнаружены и среди животных  и  микробов.

   Лектины человека.

    4Лектиноподобными белками  человека являются С-РБ,  субкомпо-

 4нент С1q комплемента, СR3 (рецептор для фрагментов С3 компонен-

 4та комплемента - С3d и ?  );  тромбоспондин тромбоцитов, фактор

 4VIII/фактор Виллебранда, лектины и лектиновые рецепторы на мак-

 4рофагах печени и селезенки.

    6Растительного происхождения:

    4Лектины найдены у более чем 800 видах растений (особенно се-

 4мейства бобовых).

    4Лектинами высших растений являются

 4- Соn A,  G (выделен из семян Сanavalin ensifermis)  -  митоген

   4для Т-супрессоров, [удлиняет протромбиновое время; связывает-

   4ся с D-маннозой; 4-валентный тетрамер];

 4- лектин  лаконоса - митоген для Т- и В-лимфоцитов (стимулирует

   4ответ В-лимфоцитов на тимусзависимый антиген);

 4- джекалин - митоген для Т-хелперов (CD4+);  активатор В-лимфо-

   4цитов;  избирательно связывает только Ig A (используется  для

   4аффинной хроматографии);  выделен из экстракта хлебного дере-

 4ва. /7493/90/

 4- фитогемагглютинин  -  митоген для Т-супрессоров;  получают из

   4экстракта Phaseolus (vulgaris  или communis);

 4- клещевины (рицин),

 4- семян чечевицы, эспарцета, лектин конских бобов,

 4- лектин гороха (связывает БОФ - альфа-1-антитрипсин,  церулоп-

   4лазмин, гаптоглобин, гемопексин), иммуноглобулины М,G,А;

 4- агглютинин из зерен пшеницы  (удлиняет  протромбиновое  время

   4(связывает факторы IX, X, и II);

 4- лектины хлебного дерева,

 4- семян сои,

 4- корней ячменя,

 4и др. /7171/94/

    6Микробного происхождения:

    4Лектинами являются белок gp120 вируса иммунодефицита челове-

 4ка, коклюшный токсин,  дифтерийный токсин, молекулы адгезии ки-

 4шечной палочки,  энтеротоксин кишечной палочки,  пилин гонокок-

 4ков, токсин шигеллы дизентерия,  холерный токсин,  гемагглютиJ.

 4pseudotuberculosis, адгезин дизентерийной амебы. /7171/94/ Лек-

 4тины грибов и дрожжей.

    6Животного происхождения:

    4Лектины выделены  из морских беспозвоночных (м.ежей,  губок,

 4м.желудя,  японского краба),  насекомых (таракана, мясной мухи,

 4угря,  корюшки),  земноводных (икры лягушки-быка и других лягу-

 4шек),  пресмыкающихся (яда змей),  птиц (кожи эмбрионов,  белок

 4хряща,  лектин печени),  млекопитающих (лектин сердца,  легких,

 4нейроглии спинного  мозга,  лизосомальные  рецепторы,  молекулы

 4фибробластов, естественных клеток-киллеров, эндотелиальных кле-

 4ток - тромбомодулин, клеток гепатомы, тромбоцитов; ИЛ-2, рецеп-

 4тор для IgЕ лимфоцитов, гликопротеин, связывающий вирус иммуно-

 4дефицита человека, рецепторы плаценты, макрофагов, купферовских

 4клеток,  лектин семенной жидкости, киллерных клеток, протеогли-

 4каны хрящей, альфа-амилаза и Са-связывающий белок поджелудочной

 4железы и др. . /7171/94/

    4Колектины - гуморальные лектины, находящиеся у млекопитающих

 4и птиц.  Это олигомеры,  состоящие из трех полипептидных цепей,

 4включающие коллагеновый и С-терминальный лектиновый домен. Лек-

 4тиновые домены связывают карбогидраты микробов,  в то время как

 4коллагеновый участок представляет  лиганды  для  коллектинового

 4рецептора на фагоцитах. Колектиновым рецептором является рецеп-

 4тор для субкомпонента С1q. /7234/94/

L[+] ш0    дек. 1999г.              2НЕСПЕЦИФИЧЕСКАЯ (ЕСТЕСТВЕННАЯ) ЗАЩИТА    Неспецифическая защита включается немедленно после появления патогенного агента.    Формирование компонентов  неспецифической  защиты происходит независимо

 

• 14:21 05 Июля 2016
  Российско-китайский медуниверситет откроет магистерскую программу по TCM
• 01:21 05 Июля 2016
  На форуме МГУ Россия и Китай обсудят научно-образовательное сотрудничество
• 11:00 04 Июля 2016
  Реморенко: "ЕГЭ-туризм" в России сходит на нет
• 10:52 04 Июля 2016
  Летняя российско-австрийская школа откроется в Москве
• 15:31 01 Июля 2016
  В СПбГУ могут воссоздать географический факультет

Заказать уникальную работу